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上海经科化学科技有限公司
Transwell迁移实验
Transwell迁移实验
价 格:
¥1
最新更新日期:
2021-08-19 21:47
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上海经科化学科技有限公司
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公司:
上海经科化学科技有限公司
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13524423207
021-54997581
联系邮箱:
jingkehuaxue@163.com
QQ:
472482400
产品属性
提供商
上海经科化学科技有限公司
服务名称
Transwell迁移实验
规格
个
产品说明
Transwell迁移实验
一、实验简介
Transwell
作为一项实验技术
,
其主要材料是
transwell
小室,其外形为一个可放置在孔板里的小杯子,杯子底层有一张具有通透性的膜,这层膜带有微孔,孔径大小从
0.1-
12μm
不等
。
根据不同需要有不同材料
,
一般常用的是聚碳酸酯膜
。
将
transwell
小室放入培养板中,小室内称为上室,培养板内称为下室。上室装上层培养液,下室内装下层培养液,二者以
transwell
小室底部的聚碳酸酯膜相隔。细胞种在上室,可以研究下层培养液中的成分对细胞生长、运动等的影响。运用不同孔径和经过不同处理的聚碳酸酯膜,可以进行细胞共培养、细胞趋化、细胞迁移、细胞侵袭等各种研究。
T
ranswell
细胞迁移实验
常用
8.0
、
12.
0μm
孔径的膜
,
上室种细胞
(一般为肿瘤细胞),下室加入
FBS
或者某些特定的趋化因子,肿瘤细胞会向营养成分高的下室迁移。对进入下室的细胞进行计数可反映肿瘤细胞的迁移能力。
T
ranswell
细胞侵袭实验
常用
8.0
、
12.
0μm
孔径的膜
,原理与
transwell
迁移实验类似。上室种细胞(一般为肿瘤细胞),下室加入
FBS
或者某些特定的趋化因子,肿瘤细胞会向营养成分高的下室运动。但是与迁移实验不同的是,本实验中,聚碳酸酯膜上室侧铺有一层基质胶,用以模拟体内细胞外基质。细胞要想穿过透性膜进入下室,需要先分泌基质金属蛋白酶(
MMPs
)将基质胶降解,方能通过聚碳酸酯膜。对进入下室的细胞进行计数即可反应细胞的侵袭能力。
二、
Transwell
细胞迁移
实验步骤
1
、
配制结晶紫染液
:
取结晶紫
0.05g
溶于甲醇制成
0.5%
的结晶紫溶液,用时用
PBS
溶液
1:5
稀释成
0.1%
的结晶紫染液。
2
、
细胞离心
:
将细胞消化、离心、无血清重悬、并稀释成
1
×
10
5
个
/ml
的细胞悬液。
3
、
下室加培养基
:
Transwell
板中加入
500
μl
含
20% FBS
的完全培养基,将小室放入板中。
4
、
上室接种细胞
:
在
transwell
小室中加入
200
μl
的
细胞悬液,将
Transwell
板
37℃
下于
CO
2
(含量
5%
)培养箱中培养
24h
。
5
、
染色
:
将小室取出,用
PBS
洗去培养基,结晶紫染色
10min
;自来水将表面的结晶紫洗除干净,用棉签将上室中接种侧的细胞擦除干净,于显微镜下对非细胞接种侧拍照。
三、
Transwell
细胞侵袭
实验步骤
1
、
配制结晶紫染液
:
取结晶紫
0.05g
溶于甲醇制成
0.5%
的结晶紫溶液,用时用
PBS
溶液
1:5
-8
成
0.1%
的结晶紫染液。
2
、
transwell
侵袭孔的制备:
将
BD matrigel
和 无血清培养基以
1:8
的比例稀释,吸取
8
0
μl
加入
transwell
的上室中,放置于培养箱中至少
2h
。
3
、
细胞离心
:
将细胞消化、离心、无血清重悬、并稀释成
5
×
10
5
个
/ml
的细胞悬液。
4
、
下室加培养基
:
Transwell
板中加入
500
μl
含
20% FBS
的完全培养基,将小室放入板中。
5
、
上室接种细胞
:
在
transwell
小室中加入
200
μl
的
细胞悬液,将
Transwell
板
37℃
下于
CO
2
(含量
5%
)培养箱中培养
48h
。
6
、
染色
:
将小室取出,用
PBS
洗去培养基,结晶紫染色
10min
;自来水将表面的结晶紫洗除干净,用棉签将上室中接种侧的细胞擦除干净,于显微镜下对非细胞接种侧拍照。
本公司还提供
“病理学”、“分子生物学”、“细胞生物学”、“图像分析”
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等各项服务:
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AB-PAS染色
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瑞士吉姆萨染色
甲苯胺蓝染色
尼氏染色
肥大细胞染色
苯胺蓝染色
LFB髓鞘染色
普鲁士蓝染色
EVG染色
苦未酸品红VG染色
Von kossa染色
茜素红染色
抗酸染色
富尔根染色
间苯二酚碱性品红染色
刚果红染色
快速革兰氏染色
亚甲基蓝染色
黑色素染色
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Goldner三色法染色
PAS-萘酚磺S染色
改良苯酚品红染色
网状纤维染色
Trap染色
β-半乳糖苷酶染色
油红O(大体)染色
镀银染色
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