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猪原代肾皮质细胞

价格：￥3500

品牌：立沃生物

产地：中国深圳

最新更新日期：2021-08-20 00:27

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立沃生物科技（深圳）有限公司

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公司：立沃生物科技（深圳）有限公司

联系人：周明

联系电话： 19902901483

联系邮箱：zm001@liver-biotech.cn

产品属性

细胞类型

原代细胞

数量

999

英文名	Renal cortex cell from pig

生长状态

贴壁

年限

一年

运输方式

液氮

规格

5million

产品说明

猪原代肾皮质细胞
Renal cortex cell from pig
（可贴壁，Cat# LV-PRC001）
(仅用于科学研究)
I 简介
本产品分离自SPF级实验猪的肾脏皮质，肾皮质是肾盏的外层部分，位于肾囊和肾髓质之间。肾皮质含有肾小球、近曲小管和远曲小管以及皮质集合管。使用肾皮质细胞可以在体外进行研究渗透调节和分泌等重要的生理过程,可广泛应用于基础生命科学研究以及药物研发中。公司可个性化定制原代细胞，满足不同客户的需求。
II 试剂与材料
-冻存猪原代肾皮质细胞（Cat# LV-PRC001）
-复苏培养基（Cat#LV-Rec001）
-肾皮质细胞培养基（Cat# LV-PRCM001）
-碎冰及冰盒
-无菌15ml离心管（冰上预冷）
-一次性移液管
-宽口移液枪头（普通移液枪头剪去尖头）
-自动移液枪
-恒温水浴锅（38°C预热）
-75%酒精
-生物安全柜
-37^oC/5%二氧化碳培养箱
-冷冻离心机（可离心15ml离心管，4°C预冷）
III 细胞的复苏与铺板
1. 将15ml离心管插入盛有足量碎冰的冰盒中，紫外消毒15分钟；预冷离心机。
2. 复苏培养基放碎冰中充分预冷，铺板培养基放入38°C恒温水浴锅中充分预热。
3. 将冻存的细胞从冷藏位置迅速转移至38°C恒温水浴锅中。尽可能多的浸入38°C水中，作规律的水平摇动，但必须确保冻存管盖子保持在水面以上。
4. 解冻冻存管约90-120秒，直至冻存管中只有

5. 少量碎冰漂浮即可。
6. 利用75%酒精消毒冻存管，并将其转移到生物安全柜。
7. 利用宽口枪头将细胞重悬（轻轻吹打2次），并转移至预冷的15ml离心管中（注意：冻存管与枪头上有较多残留细胞存在，可用1ml复苏培养基对冻存管与枪头进行清洗）。
8. 向细胞悬液逐滴加入预冷复苏培养基，每1ml细胞悬液加入10ml复苏培养基（注意：前3ml要缓慢逐滴加入并轻微摇晃，后面7ml可加快速度），最后轻微上下颠倒1次混匀。
9. 220×g，4°C离心3分钟；去掉上清并用肾皮质细胞培养基重悬。
10. 根据经验，沉淀的细胞用肾皮质细胞培养基重悬并定容至4ml，用台盼蓝排除法测定肾皮质细胞的存活率和细胞总量。
11. 将细胞以2×10⁴个细胞/cm²的密度接种至培养皿中。摇匀，在37°C / 5% 二氧化碳培养箱中培养。16-24小时换液。
IV 肾皮质细胞培养与传代
1. 细胞融合度达到70-90%时可进行传代。
2. 提前将培养基、PBS、胰酶放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内。
3. 吸除旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察
4. 待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜肾皮质细胞培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液（控制吹打的力度，避免产生大量的气泡）。
5. 220×g，室温离心3分钟；去掉上清并用培养基重悬。
6. 以1：3或者1：4传代，将细胞悬液接种到新的细胞瓶内，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
Ⅴ联系方式
公司电话：0755-28284050
技术支持：19902901483（周博士）

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