小双节RNA病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒

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中国/德国
2021-08-20 04:51

上海钰博生物科技有限公司

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上海钰博生物科技有限公司
顾磊
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shybio@126.com
产品属性
保存条件‘-20℃保存
保质期有效期一年
数量30
供应商上海钰博生物科技有限公司
规格50次
产品说明
PCR试剂盒包装规格及成分
编号成分十孔盒包装(去纸托)
试剂一2×PCR MagicMix1mL(亮黄盖)
试剂二成分 PCR 引物混合液100 uL(白盖)
试剂三成分 PCR 阳性对照50 uL(黄盖)
试剂四超纯水1 mL(本色盖)
试剂五DNA 释放剂试用装 50 次(成分见下)
试剂六免 DNA 提取试剂溶液 A 成分一50 uL(白盖)
试剂七免 DNA 提取试剂溶液 A 成分二100uL(绿盖)
试剂八免 DNA 提取试剂溶液 B400 uL(红盖)
试剂九使用手册1














简并性引物对PCR扩增有无影响?
有影响。简并数量应尽量少。
通常一条引物中简并的碱基不要超过4处,如果简并的碱基数过多,则会造成反应体系中有效引物的量相对减少,此时应适当增加引物的使用量。但引物量过大,容易引起非特异扩增,应加以注意。

适合的模板添加量是多少?
根据基因组DNA、质粒DNA及反转录产物等模板种类不同,PCR反应的适合模板添加量也不同。 特别是使用PrimeSTAR® HS DNA Polymerase时,过剩的模板量有时会对PCR扩增产生阻害作用。 另外,使用PrimeSTAR® Max DNA Polymerase时,根据模板种类、模板使用量及模板质量可调整PCR反应条件。
使用PrimeSTAR® Max DNA Polymerase时,模板可按以下推荐量添加(50 μl反应体系):
· Human genomic DNA:5~200 ng
· E.coli genomic DNA: 100 pg~100 ng
· cDNA Library:1~200 ng
· λDNA:10 pg~10 ng
· 质粒DNA:10 pg~1 ng

PCR产物 (3‘端附有A碱基时) 经末端平滑后,克隆于去磷酸的平滑末端载体时,其PCR产物需不需要5′末端磷酸化?
需要。一般的PCR用引物5′末端都不带磷 (除非在引物合成时已特别标记)。使用这种引物进行PCR的PCR产物经末端平滑化后,与去磷酸的平滑末端载体连接之前,PCR产物必须进行5′末端磷酸化。