高/低密度脂蛋白测试盒(E2HL-100)

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Bioassay Systems
美国
2021-08-20 12:55

成都安森盛源科技有限公司

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成都安森盛源科技有限公司
李朝书
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产品说明
产品说明
高密度脂蛋白(HDL)和低密度(LDL)/极低密度(VLDL)脂蛋白中的胆固醇浓度与冠心病密切相关。功能性HDL为清除细胞和动脉中的胆固醇提供保护。高水平低密度脂蛋白和低水平高密度脂蛋白常见于发动脉粥样硬化且与心血管疾病有着紧密的联系。高或低密度脂蛋白之间的平衡完全由遗传因素决定,但药物治疗,食物选择和其他因素亦可改变。

简单、直接和自动化的检测手段测量HDL和LDL/VLDL中胆固醇浓度非常令人期盼。博世生物技术的HDL和LDL/VLDL 定量测试盒是基于改良的聚乙二醇沉淀法,仅需单一工作试剂完成胆固醇脂水解,氧化和颜色反应。在570nm处产物的颜色强度或在lem/ex = 585/530nm处的荧光强度直接与样品中胆固醇浓度成正比。

产品特点
灵敏准确:线性检测范围在96孔板,比色法为1-100 mg/dL,荧光法为0.2-10 mg/dL胆固醇。
方便:室温检测,无需37°C加热器。

适用范围
缓冲液: 20 mL 酶试剂: 120 mL
显色剂: 120 mL 标准液:1 mL 300 mg/dL 胆固醇/低密度脂蛋白测试盒(E2HL-100)

直接检测:血清中的HDL和LDL/VLDL胆固醇含量。
药理学:药物对胆固醇代谢的影响。

试剂盒组成(96孔板供100份检测)
PBS: 2 ´ 1.5 mL 沉淀试剂: 1.5 mL


贮存条件:室温贮存PBS和沉淀试剂,其余试剂需在-20°C下贮存。

注意事项: 本产品仅供研究用。使用过程中应严格遵循实验安全措施。

比色法检测步骤
注: 除酶试剂外将所有试剂需放置至室温。血清样本应无溶血发生。

1. 样品处理: 将20 mL血清移至1.5 mL离心管。再加20 mL沉淀试剂。混匀后, 以9500g的速度离心5分钟(台式离心机为9500转/分钟)。小心将24 mL上清液移至一洁净试管,加96 mL缓冲液,在试管上标明“HDL”。

小心移除所有剩下的上清液,加40 mL PBS 并用移液器充分混合沉淀物,将24mL混合液移至另一洁净试管,加入96mL缓冲液,在试管上标明“LDL/VLDL”。

取第三只试管,移入12 mL血清样品和108 mL缓冲液,充分混合,标明试管为“总合”。

稀释胆固醇标准液: 将5 mL 300 mg/dL的胆固醇标准液与145 mL缓冲液混合。标明试管为“标准”。

2. 检测: 将50 mL缓冲液(空白),50 mL标准液,50 mL“总合”, 50 mL“HDL”, 和50 mL“LDL/VLDL”加入到透明平底96-孔板的不同孔内。如果需要,可一式两份。

对每一个反应孔,按55 mL缓冲液、1 mL酶试剂和1 mL显色剂的比例配制足量工作试剂。向每个标准和样品孔里加入50 mL工作试剂。轻敲孔板使之充分混合。
室温下培养30分钟,读取570nm处OD值。

注: 如果样品OD值比标准品OD值高,则用缓冲液稀释样品再重复检测。结果乘以稀释的倍数。

3. 浓度计算: Total, HDL和 LDL/VLDL中的胆固醇浓度计算如下


荧光法检测步骤
用缓冲液按1:10稀释比色法中准备好的样品和标准液。将稀释的50 mL标准液和50 mL样品加入到黑色96-孔板的不同孔内。

加50 mL工作试剂(参看比色法)。轻敲孔板使之混合。室温下培养30分钟后读取lex = 530nm 和 lem = 585nm处的荧光值。

注: 如果样品荧光值比标准品荧光值高,则用缓冲液稀释样品再重复测验。结果乘以稀释的倍数。

样品胆固醇浓度计算如下


实验必需品(未提供)
吸液用仪器及配件。透明平底96孔板,吸光度分析仪。

举例
采用本法检测的血清样品的胆固醇浓度。


参考文献
[1]. Viikari J. (1976). Precipitation of plasma lipoproteins by PEG 6000 and its evaluation with electrophoresis and ultracentrifugation. Scand J Clin Lab Invest 36:265-268.

[2]. Demacker, PMN et al. (1980). A study of the use of polyethylene glycol in estimating cholesterol in high density lipoprotein. Clin Chem 26:1775-1779.

[3]. Widhaim, K. and Pakosta, R. (1991). Precipitation with Polyethylene Glycol and Density-Gradient Ultracentrifugation Compared for Determining High-Density Lipoprotein Subclasses HDL2 and HDL3. Clin. Chem 37/2, 238-240.