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快速质粒DNA小量提取试剂盒

价格：¥230

品牌：天漠生物

产地：北京

最新更新日期：2021-08-20 16:27

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北京天漠科技开发有限公司

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公司：北京天漠科技开发有限公司

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产品属性

保存条件

室温

保质期

1年

英文名	TIANMO BIOTECH

供应商

天漠科技

规格

50次

产品说明

快速质粒DNA小量提取试剂盒

Catalog No. TD436-50 (50次反应) TD436-100 (100次反应)
TD436-200 (400次反应)

Highlights

无需沉淀菌液，直接从培养菌液中提取质粒DNA。
独有的显色反应，可以直接观察到细胞裂解中和的程度，极大方便操作者判断其状态。

产品组成:

试剂盒组成	保存	50次	100次	400次
质粒DNA裂解液（蓝色）	室温	6ml	12ml	48ml
质粒DNA中和液（黄色）	室温	20 ml	40 ml	160 ml
质粒DNA预洗液	室温	15 ml	30 ml	120 ml
质粒DNA洗涤液	室温	10 ml 15 ml 25 ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇
质粒DNA洗脱液	室温	10ml	20ml	30ml
2号柱	室温	50个	100个	400个
收集管（2ml）	室温	50个	100个	400个

Note –售出后一年内产品质量是可以保证。试剂已经过大量的常规检测来保证其可操作性。此产品仅供研究并且需要由专业人员来使用。
试剂盒中的部分试剂是有刺激性的。请带好手套和防护眼镜。

注意事项:

环境温度低时溶液质粒DNA裂解液中SDS可能会析出沉淀，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清，不要剧烈摇晃，以免形成过量的泡沫。
避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
RNase A 已经添加到质粒DNA中和液中，请将中和液放置在4-10°保存，RNase A的终浓度为200ug/ml
溶液质量DNA中和液含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。

特性:

DNA 纯度: 获得的质粒产量高、纯度好，可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等

。一般情况Abs260/280≥ 1.8 。

质粒DNA产量: 每次可提取到约 25 µg ，主要依据质粒的拷贝数，培养物的成长环境等因素。
质粒DNA大小: 最高可达25 kb。
洗脱体积: ≥ 30 µl。
操作温度: 室温(15-30°C)。

溶液制备:（使用之前需要配制）

. 10次反应的质粒DNA洗涤液已经添加乙醇无需添加。
50次反应的质粒DNA洗涤液应添加24 ml 100%的乙醇到6ml的质粒DNA洗涤液中。
100次反应的质粒DNA洗涤液应添加48 ml 100%的乙醇到12ml的质粒DNA洗涤液中。
200次反应的质粒DNA洗涤液应添加192ml 100%的乙醇到48ml的质粒DNA洗涤液中。
加入后请及时在方框打钩标记，以免多次加入!

操作步骤:

以下操作步骤均在室温下操作。乙醇已经添加到质粒DNA洗涤液中。
质粒DNA中和液使用前需要放置到4-10°预冷。

取600μl过夜培养的菌液直接添加到1.5ml离心管中。（最多可以处理3ml菌液，a.加入1.5ml菌液最大速度离心30秒， b.重复步骤a , c.添加600μlTE重悬沉淀）

添加100μl的质粒DNA裂解液到同一个1.5ml离心管中，温和地颠倒离心管数次使菌体充分裂解直到溶液完全变成蓝色。（操作此步时间一定要短并且避免剧烈震荡）

添加350μl预冷的质粒DNA中和液到上述离心管中，立即温和地上下翻转数次，中和完全后会出现黄色絮状沉淀（反复颠倒数次确保中和完全，中和完全后溶液呈黄色）

将上述1.5ml离心管放入离心机中，11,000 – 16,000 x g离心5分钟。

将上一步所得上清（~900μl）加入2号柱（柱套在收集管内），11,000 – 16,000 x g离心1分钟，倒掉收集管中的废液。

加入200μl质粒DNA预洗液，11,000 – 16,000 x g离心1分钟，无需倒掉废液。

加入400μl质粒DNA洗涤液（请先检查是否已加入无水乙醇!），11,000 – 16,000 x g离心1分钟，弃掉废液。
将收集管中的废液倒掉，并将2号柱套回收集管中，在11,000 – 16,000 x g下额外离心2分钟，尽量除去洗涤液，以免洗涤液中残留乙醇抑制下游反应。

取出2号柱，放入一个干净的离心管中，在吸附膜的中间部位加30μl质粒DNA洗脱液。（洗脱液事先在 65-70℃水浴中预热，洗脱效果更好），室温放置2分钟，11,000 – 16,000 x g离心1分钟来洗脱质粒DNA。

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