大鼠原代肝星形细胞
Rat hepatic stellate cells
（可贴壁，Cat# LV-HSC002）
(仅用于科学研究)
I 简介
肝星形细胞占肝脏细胞的比例相对较低，呈梭形或多边形，胞浆内有多个富含维生素A的脂滴。在正常肝脏中，星状细胞处于静止状态，表达marker基因Desmin，增殖活性低。依靠本公司在原代肝脏细胞分离与纯化上的技术优势，大鼠原代肝星形细胞分离自SPF级大鼠，来源清晰，细胞活力高（>85%），细胞纯度高（>90%），性价比高，可广泛应用于基础生命科学研究以及药物研发中。公司可个性化定制原代细胞，可分离不同品系、不同药物处理（如CCl₄）的细胞，满足不同客户的需求。
II 试剂与材料
-冻存大鼠原代肝星形细胞（Cat# LV- HSC002）
-肝星形细胞专用培养基
-碎冰及冰盒
-无菌15ml离心管（冰上预冷）
-宽口移液枪头（普通移液枪头剪去尖头）
-生物安全柜
-自动移液枪
-恒温水浴锅（38°C预热）
-冷冻离心机（可离心15ml离心管，4°C预冷）
-37^oC/5%二氧化碳培养箱
-75%酒精
III 细胞的复苏与铺板
1. 将所有试剂耗材至于生物安全柜中，紫外消毒15分钟；预冷离心机；铺板培养基放入38°C恒温水浴锅中充分预热。
2. 将冻存的肝星形细胞从冷藏位置迅速转移至38°C恒温水浴锅中。尽可能多的浸入38°C水
中，作规律的水平摇动，但必须确保冻存管盖子保持在水面以上。
3. 解冻冻存管约90 - 120秒，直至冻存管中只有少量碎冰漂浮即可。
4. 600Ⅹg，4°C离心5分钟。
5. 利用75%酒精消毒冻存管，并将其转移到生物安全柜；去掉上清并用肝星形细胞专用培养基重悬。
6. 根据经验，沉淀的细胞用星形细胞专用培养基重悬并定容至4ml，用台盼蓝排除法测定星形细胞的存活率和细胞总量。
7. 将细胞以2×10⁴个细胞/cm²的密度接种至培养皿中。摇匀，在37°C / 5% 二氧化碳培养箱中培养。24小时后换液，以后隔天换液。
IV 肝星形细胞培养与传代
1. 通常情况下，我司不建议客户对细胞进行传代，因为传代细胞可能会丢失部分细胞特性。
2. 在本培养体系中，细胞在铺板培养后第7-8天可传代，细胞可检测到肝星形细胞标记基因Desmin及a-SMA的表达。客户可根据实验需求加以考虑。
3. 肝星形细胞可制备成永生化细胞，满足部分基础实验研究。
Ⅴ联系方式
公司电话：0755-28284050
技术支持：19902901483（周博士）