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人绿色荧光蛋白ELISA检测试剂盒说明书

价格：￥1300 - 1900

品牌：西格

产地：进口、国产

最新更新日期：2021-08-24 00:36

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上海西格生物科技有限公司

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公司：上海西格生物科技有限公司

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产品属性

供应商

上海西格

数量

样本	体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等等

标记物

详见说明书

适应物种	大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、等动植物

应用

ELISA检测

检测方法

详见说明书

检测限	用于检测血浆，血清及相关液体等样本

规格

48T/96T

产品说明

实验流程:
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备；
2. 加样（标准品及样本）100µL，37°C孵育1小时；
3. 吸弃，加检测溶液A100µL，37°C孵育1小时；
4. 洗板3次；
5. 加检测溶液B100µL，37°C孵育30分钟；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分钟；
8. 加终止液50µL，立即450nm读数。
产品名称：人绿色荧光蛋白ELISA检测试剂盒说明书
英文名称：Green fluorescent protein
检测范围：3.125ng/ml~100ng/ml
灵敏度：0.1
规格：96T/48T
保存；2-8℃。
检测目的：用于检测血浆，血清及相关液体等样本。例如灌洗液、脑脊液、血清、血浆、尿液、胸腹水、细胞培养上清、组织匀浆等标本.
检测种属：大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、等动植物。

备试剂与收集血样：
1. 收集标本：血清、血浆（EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测， 2-8 ℃ 保存48 小时；更长时间须冷冻（ -20 ℃或 -70 ℃ ）保存，避免反复冻融。
2. 标准品液配制：使用前加入0.5ml 蒸馏水混匀，配成 120 0ng/ml 的溶液。设标准管 8 管，管加标本稀释液 900ul ，第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ，移至第二管。如此反复作对倍稀释，从第七管中吸出 500ul 弃去。第八管为空白对照。
3. 10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释（示例： 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水）。
4. 洗涤液：用重蒸水 1:20 稀释（示例：1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水）
检测程序：
1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品 100ul ，将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次，向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板：同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
6. 洗板：同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ，置 37 ℃ 暗处反应15 分钟。
8. 每孔加入100ul 终止液混匀。
9. 30分钟内用酶标仪在 45 0 nm 处测吸光值。

使用方法：
测定法的灵敏度来自作为报告的酶。众所周知，酶是一种有机催化剂，很少量的酶即可诱导大量的催化反应，产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 24μg/ml 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
12μg/ml 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
6μg/ml 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
3μg/ml 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
1.5μg/ml 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。|
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
操作流程：
（1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。产品仅用于科研
MC38小鼠结肠癌细胞 MC38 mouse colon cancer cells DMEM+10%FBS吲哚-4-羧酸甲酯(>98%，BR)质量规格：>98%，BRMethyl indole-4-carboxylate
HBEGF Protein Human 重组人 HBEGF / D 蛋白甲基绿(~65%,BS)质量规格：~65%,BSMethylene green zinc chloride double salt
TE-13(人食管癌细胞) 5×106cells/瓶×2 心肌成纤维细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)亚甲紫3RAX(>90%，BS)质量规格：>90%，BSMethylene violet 3RAX
小鼠垂体瘤细胞;GT1-12-甲基琥珀酸(>98%,BR)质量规格：>98%,BRMethylsuccinic acid
人表皮微血管内皮细胞(HDMEC)( 5×105 )二氢-D-赤-鞘氨醇质量规格：美国进口Dihydro-D-erythro-Sphingosine
EM2 Others Mouse 小鼠 EM2 人细胞裂解液 (阳性对照) 半木质，英文名或英文缩写：Xylan，级别：超，98%，规格：0.25UN
人表皮色素细胞-HEM-a2-磺基本加醋，水合 2-Sulfobqnzoic ccid 1963/2/7
DAPK1 Others Human 人 DAPK1 / DAP Kinase 1 (aa 1-363) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) HexyleneGlycol己二醇美国国家处方集级透明无色液体RT不sigma
兔角膜后基质层成纤维细胞;RCBBF酸性绿O，英文名或英文缩写：Naphthol green B，级别：AR，98%，规格：25克
Y1细胞，肾上腺皮质细胞人胰腺癌细胞,MIApaca-2细胞 CM-M008小鼠支气管成纤维细胞完全培养基100mL369-07-32-硝基本-β-D-半乳糖苷(+4°C)2-nitnopxenyl-beta-D-galactopyranoside
FGFR1 Others Mouse 小鼠 FGFR1 / CD331 人细胞裂解液 (阳性对照) 2-Hexanone基25克CP，99.5%
EB病毒转化的人B细胞(拉祜族);KM9406本晴 Bqnzonitnilq
TLR2 Others Mouse 小鼠 TLR2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) Driselase崩溃酶25克BR，2000-6000U /mg，Type VI
CL-0396NCI-H226(人肺鳞癌细胞)5×106cells/瓶×2AZUREA,CHLORIDESALT天青A高级5G531-53-3RT
H9c2大鼠心肌细胞(ATCC来源) 人髓母细胞瘤，D341 Med细胞 NCI-H226 [H226](人肺癌细胞)(7H9肉汤)
人绿色荧光蛋白ELISA检测试剂盒说明书HSCT6 大鼠肝星状细胞泮托拉唑钠1.5水合物Pantoprazole Sesquihydrate质量规格：>98%,BR
CM-R003大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞完全培养基100mL泮托拉唑钠1.5水合物(标准品)Pantoprazole Sesquihydrate质量规格：HPLC≥99%，标准品
KM3, 人多发性骨髓瘤细胞(S)-10-羟基喜树碱;10-羟基喜树碱(s)-10-hydroxycamptothecin质量规格：>98%,BR
细胞人脑微血管内皮细胞完全培养基 100mL10-羟基喜树碱(标准品)(s)-10-hydroxycamptothecin质量规格：HPLC>98%,S构型，标准品
人脂肪微血管内皮细胞HAMEC甘草素（消旋）Liquiritigenin质量规格：HPLC≥98%，标准品
性能：
1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
2. 灵敏度：检测浓度小于0.1 U/mL。
3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
6. 有效期：6个月

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