细胞介绍

该细胞来源于一位3岁的白人Burkitt淋巴瘤患者;EBV阴性;表达IL-4受体和低亲和性IgE受体(CD23);分泌IgM(lamda L);表达膜型和分泌型的免疫球蛋白。

细胞特性

1) 来源：血液

2) 形态：淋巴母细胞样，悬浮生长

3) 含量：>1x106 个/mL

4) 污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5) 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

运输和保存

可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式：

(1)干冰运输，收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏;

(2)存活细胞，收到后应继续生长，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

(3)收到细胞后请拍照，3天内如果发现污染，请及时拍照与我们联系。

细胞用途：仅供科研使用。

细胞接收后的处理：

1) 收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。

2) 请先在显微镜下确认细胞生长状态，酒精消毒瓶壁并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。

3) 将T25瓶中的细胞培养基离心后，去上清，添加6ml完全培养基，加入新的T25瓶中继续培养。

4) 如果细胞长满80%请及时进行细胞传代.

5)接到细胞次日，请检查细胞是否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。

细胞培养步骤

一.培养基及培养冻存条件准备：

1) 准备RPMI-1640培养基;优质胎牛血清(热灭活)，10%;双抗，1%。

2) 培养条件： 气相：空气，95%;二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

二. 细胞处理：

1) 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养，补加培养基至6ml。

2) 细胞传代：如果细胞密度达80%，即可进行传代培养。

注：第一次传代推荐传代比例为1:2，以后传代比例可根据客户需要自己决定。

3)细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。

下面T25瓶为类;

1，细胞冻存时，取上清，可使用血球计数板计数。

2，4min ，1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞，根据细胞数量加入血清和DMSO，轻轻混匀，DMSO终浓度为10%，细胞密度1-2xE6/ml，每支冻存管冻存1ml细胞悬液，注意冻存管做好标识。

3，将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。