联系电话：15527510518 18163548455 13296670271 13296673586QQ：1546342329 3176445674 试剂盒检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被样本抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的样本呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
1.酶标仪（450nm）
2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱
操作注意事项
1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成| 名称 | 96孔配置 | 48孔配置 | 备注 |
| 微孔酶标板 | 12孔×8条 | 12孔×4条 | 无 |
| 标准品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 无 |
| 样本稀释液 | 6mL | 3mL | 无 |
| 检测抗体-HRP | 10mL | 5mL | 无 |
| 20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15mL | 按说明书进行稀释 |
| 底物A | 6mL | 3mL | 无 |
| 底物B | 6mL | 3mL | 无 |
| 终止液 | 6mL | 3mL | 无 |
| 封板膜 | 2张 | 2张 | 无 |
| 说明书 | 1份 | 1份 | 无 |
| 自封袋 | 1个 | 1个 | 无 |
注：标准品浓度都不相同，麻烦联系客服索取相应说明书
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
1. 手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。
2. 自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。
操作步骤
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3. 样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
结果判断
绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。
试剂盒性能
1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
2. 灵敏度：最低检测浓度小于（参考说明书）
3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
6. 有效期：6个月
武汉纯度生物科技有限公司，主要销售常用抗原抗体、试剂、Elisa试剂盒、生化试剂盒、免疫检测试剂盒、金标试剂盒、金标检测卡、动物血清、血浆、全血、抗血清、毒素类标准品、生物试剂、培养基、实验室仪器耗材、化学试剂、生物制品、标准品、对照品、生化免疫制品、免疫亲和柱、菌株、质粒、室内质控品、细胞、培养基、PEG、病理染色液、免疫学试剂、蛋白组学试剂、细胞生物学试剂、分子生物学试剂、抑制剂、细胞因子等。武汉纯度生物时刻谨记产品质量，正如公司名一样，达到“专业规格，纯度保证”的质量生命线。公司秉承“客户为天，质量为根，诚信为本，创新为魂”的信念，将以优质的产品，完善的服务，为每一位客户的实验保驾护航。
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生化试剂盒（植物激素类、土壤类、谷胱甘肽类、蛋白酶类、蔗糖、淀粉类试剂盒、氨基酸代谢类、脂酶类）分光光度法试剂盒，微量法试剂盒、气相试剂盒，液相试剂盒、DNA提取试剂盒等、乳胶增强免疫比浊法、双缩脲等方法试剂盒，乙肝甲肝梅毒等胶体快速检测卡、试剂条。
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动物血浆：人血浆、新生牛血浆、大牛血浆、小牛血浆、绵羊血浆、山羊血浆、猪浆、驴血浆、马血浆、狗血浆、大鼠血浆、小鼠血浆、豚鼠血浆、兔血浆、空白小鼠血浆、空白大鼠血浆、SD大鼠血浆等等。
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小鼠凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA试剂盒 48T/96T
小鼠抗凝血酶受体(ATR)ELISA试剂盒 48T/96T
小鼠凝血酶受体(TR)ELISA试剂盒 48T/96T
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小鼠磷酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA试剂盒 48T/96T
小鼠β内啡肽(β-EP)ELISA试剂盒 48T/96T
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小鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA试剂盒 48T/96T
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小鼠骨胶原交联(Cr)ELISA试剂盒 48T/96T
小鼠促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒 48T/96T
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小鼠脱氧吡啶酚/脱氧吡啶啉(DPD)ELISA试剂盒 48T/96T
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小鼠促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA试剂盒 48T/96T
小鼠骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)ELISA试剂盒 48T/96T
小鼠转铁蛋白受体(TFR/CD71)ELISA试剂盒 48T/96T
小鼠半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA试剂盒 48T/96T
小鼠第八因子相关抗原(FⅧAg)ELISA试剂盒 48T/96T
小鼠丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA试剂盒 48T/96T
小鼠催乳素(PRL)ELISA试剂盒 48T/96T
小鼠抵抗素(Resistin)ELISA试剂盒 48T/96T
小鼠乙酰胆碱受体抗体(AChRab)ELISA试剂盒 48T/96T
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小鼠P物质受体(SP-R)ELISA试剂盒 48T/96T
小鼠P物质(SP)ELISA试剂盒 48T/96T
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小鼠胰岛素原(PI)ELISA试剂盒 48T/96T
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小鼠抗心肌抗体(AMA)ELISA试剂盒 48T/96T
小鼠铜蓝蛋白(CP/CER)ELISA试剂盒 48T/96T
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小鼠诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA试剂盒 48T/96T
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小鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA试剂盒 48T/96T
小鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA试剂盒 48T/96T
小鼠水通道蛋白3(AQP-3)ELISA试剂盒 48T/96T
小鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA试剂盒 48T/96T
小鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA试剂盒 48T/96T
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小鼠甲状腺球蛋白(TG)ELISA试剂盒 48T/96T
小鼠抑制素A(INH-A)ELISA试剂盒 48T/96T
小鼠绒毛膜促性腺激素β(β-CG)ELISA试剂盒 48T/96T
小鼠性激素结合球蛋白(SHBG)ELISA试剂盒 48T/96T
小鼠脱氢表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA试剂盒 48T/96T
小鼠脱氢表雄酮(DHEA)ELISA试剂盒 48T/96T
小鼠内皮脂肪酶(EL)ELISA试剂盒 48T/96T
小鼠碳酸酐酶(CA)ELISA试剂盒 48T/96T
小鼠降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA试剂盒 48T/96T
小鼠胃动素(MTL)ELISA试剂盒 48T/96T
小鼠生长抑素(SS)ELISA试剂盒 48T/96T
小鼠血小板活化因子(PAF)ELISA试剂盒 48T/96T
小鼠横纹肌辅肌动蛋白α (sm Actinin-α)ELISA试剂盒 48T/96T
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小鼠主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ/H-2Ⅰ)ELISA试剂盒 48T/96T
小鼠GATA结合蛋白4(GATA4)ELISA试剂盒 48T/96T
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小鼠可溶性血小板内皮细胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA试剂盒 48T/96T
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