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大象孕酮(PROG)ELISA检测试剂盒

价格：¥1600 - 1800

品牌：卡米洛camilo

产地：进口/国产

最新更新日期：2021-08-24 08:58

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南京卡米洛生物工程有限公司

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公司：南京卡米洛生物工程有限公司

联系人：李经理

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QQ： 2312507945

产品属性

供应商	南京卡米洛生物工程有限公司

样本	血清、血浆、细胞上清液、胸腹水、脑脊液、固体样本处理后的上清液等等均可以

数量

100

标记物

详询

适应物种

大象

应用

科学研究

检测方法

双抗体一步夹心法

检测限

详见说明书

规格

48T/96T

产品说明

试剂盒性能
有效期：6个月
保存条件：2-8℃，避光防潮保存
准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数 R 值，大于等于 0.9600
特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应
重复性：板内、板间变异系数均小于 15%
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被相关指标的抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的相关指标呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心 10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心 30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心 10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品

酶标仪（450nm）
高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
37℃恒温箱

操作注意事项

试剂盒保存在 2-8℃，使用前室温平衡 20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
浓度为 0 的标准品可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释 5 倍，最终结果乘以5才是样本最终浓度。
严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
所有液体组分使用前充分摇匀。
若中英文说明书有误，请以中文说明书为准。
20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按 1：20 稀释，即 1 份的 20×洗涤缓冲液加 19 份的蒸馏水。
不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

洗板方法
1.手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置 1min 后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板 5次。
2.自动洗板机：每孔注入洗液 350μL，浸泡 1min，洗板 5 次。
试剂盒组成
名称 96 孔配置 48 孔配置备注
微孔酶标板12 孔×8 条 12 孔×4 条无
标准品0.5mL0.5mL按说明书进行稀释
标准品稀释液6mL 3mL 按说明书进行稀释
样本稀释液6mL 3mL 按说明书进行稀释
检测抗体-HRP 6mL 3mL 无
20×洗涤缓冲液 20mL 20mL 按说明书进行稀释
底物 A 6mL 3mL 无
底物 B 6mL 3mL 无
终止液6mL 3mL 无
封板膜2 张 2 张无
说明书1 份 1 份无
自封袋1 个 1 个无
操作步骤
1.从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回 4℃。
2. 设置标准品孔、样本孔和空白孔，空白孔什么都不加；标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL；
3. 待测样本孔先加待测样本 10μL，再加样本稀释液 40μL；
4. 随后标准品孔和样本孔中（空白孔不加）加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体 50μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置 1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板 5 次（也可用洗板机洗板）。
6. 所有孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。
7. 所有孔加入终止液 50μL，15min 内，在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。
结果判断
绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。
免责声明

试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或生物体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。
严格按照说明书操作，不同批号不可交换使用，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。

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