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北京百奥莱博供应的结核分枝杆菌基因分型试剂盒(HV-3)价格厂家用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多结核分枝杆菌基因分型试剂盒(HV-3)等核酸扩增(PCR)产品请联系我司咨询订购。
名称:结核分枝杆菌基因分型试剂盒(HV-3)价格厂家
产地:国产|进口
规格:50次
编号:WE0119
英文名:TB Typing Kit(HV-3)
本试剂盒是以分子流行病学最新研究进展为基础,经工艺优化后形成的人型结核分枝杆菌基因分型产品。本产品利用结核分枝杆菌基因组中可变数目串联重复序列(variable-number tandem repeats, VNTR)多态性进行基因型分型区分临床菌株,是研究结核分枝杆菌分子流行病学和监测结核病传播状况的有力工具。与现有其它基于VNTR原理的结核分枝杆菌VNTR分型系统相比,这一分型系统对中国流行的菌株具有更强的分辨能力 ,因此特别适合于中国用户的需求。
通过对各PCR反应引物序列和预混反应液成份进行精心优化,使得本产品具有很强的抗干扰力。与用户自配试剂相比,本产品显著提升了特异条带信号强度,降低了使用粗制模板(煮沸菌液)时非特异条带的出现率,使实验操作更加简便、快捷的同时,提高了检测成功率。本产品的预混反应液化学稳定性良好,能有效抵抗反复冻融(10次)和较长时间(一周)的室温环境,更好地适应了用户检测工作中的灵活性需求。
本试剂盒是TB基因分型试剂盒VNTR-9(货号WE0118)的配套产品。对VNTR-9试剂盒鉴定为成簇或相同菌株的样本,如有必要,可使用本产品做更精细的进一步分型鉴定。本产品中的3个高分辨率检测位点VNTR3820,VNTR4120和VNTR3232与VNTR-9中的9个检测位点结合使用可将检测的分辨率指数(Hunter-Gaston index,HGI)提升至0.993 。
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关于结核分枝杆菌基因分型试剂盒(HV-3)价格厂家的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·RNase A溶液(10mg/ml)
编号:WE0224
英文名称:RNase A(10mg/ml)
规格:1ml
·人类基因组DNA
编号:WE0226
英文名称:Human Genomic DNA
规格:20μg
本产品是一类高纯度的基因组DNA提取物,琼脂糖凝胶(0.7%)电泳检测显示该DNA提取物大小在15Kb以上,且基本无降解,可广泛应用于PCR、酶切、杂交、微阵列分析等分子生物学实验。
·抗GST标签琼脂糖介质
编号:WE0331
英文名称:Anti-GST Mouse Monoclonal Antibody Agarose Resin
规格:100μl|500μl
抗GST标签免疫亲和介质是将抗GST标签的单克隆抗体共价偶联到琼脂糖上,这种琼脂糖能进行免疫沉淀或者免疫共沉淀,能检测含有GST标签的蛋白。
抗体类型:鼠单克隆抗体IgG1
免疫原:人工合成多肽序列
应用范围:IP
·HRP标记抗GST标签多克隆抗体
编号:WE0342
英文名称:HRP Conjugated Anti GST-Tag Rabbit Polyclonal Antibody
规格:20μl|100μl
本抗体为经辣根过氧化物酶(HRP)直接标记的抗GST标签兔多克隆抗体,与GST结构域具有高亲和性,可特异地识别GST蛋白和GST-Tag融合蛋白。本产品经HRP直接标记,无需使用二抗,可直接用相应酶底物显色或化学发光法检测目的蛋白,减化了实验步骤,避免由二抗交叉反应引起的非特异性条带。
抗体类型:兔IgG
免疫原:人工合成多肽
标记物:HRP
应用范围:WB(1:1000-5000)、ELISA(1:1000-20000)
·溶菌酶
编号:WE0214
英文名称:Lysozyme
规格:100mg
本抗体为经辣根过氧化物酶(HRP)直接标记的抗GST标签兔多克隆抗体,与GST结构域具有高亲和性,可特异地识别GST蛋白和GST-Tag融合蛋白。本产品经HRP直接标记,无需使用二抗,可直接用相应酶底物显色或化学发光法检测目的蛋白,减化了实验步骤,避免由二抗交叉反应引起的非特异性条带。
抗体类型:兔IgG
免疫原:人工合成多肽
标记物:HRP
应用范围:WB(1:1000-5000)、ELISA(1:1000-20000)
·Protein G琼脂糖凝胶
编号:WE0270
英文名称:Protein G-Sepharose
规格:5ml
本产品为Protein G与Sepharose偶联后产物,可从血清,腹水,细胞培养上清和细胞抽提物中分离和纯化多种哺乳动物丌同亚型的抗体或包含抗体Fc片段的基因工程重组蛋白。Protein G是链球菌(group C和G)细胞表面蛋白。它不Protein A类似,通过不免疫球蛋白的Fc区相互作用,可结合大多数哺乳动物的IgG。但两者结合特异性有所丌同。Protein G对人IgG3,小鼠IgG1,大鼠IgG2a等具有高亲和力。天然Protein G具有白蛋白和细胞表面结合域。重组Protein G去除了白蛋白和细胞表面结合域,以减少非特异性结合。本产品具有广谱 IgG结合、高Fc段结合活性、高抗体吸附量和性能稳定等特点,可重复多次使用。
注意事项:
1、凝胶从冷室或冰箱中取出后在室温下缓慢振摇恢复到室温后装柱,避免产生气泡影响柱效。
2、装柱时尽可能维持凝胶长径比为5:3-2:1,长径比过大将导致洗脱峰拖尾,洗脱体积增大;长径比过小将导致样品与填料接触时间短,吸附不充分,填料吸附蛋白量小。
3、若上样液中抗体浓度过高,应使用平衡缓冲液稀释至1-2 mg/ml,以免上样浓度过高影响柱效。
4、可以采用降低上样时的流速来增加样品与填料接触时间从而提高纯化抗体量。
5、凝胶用低pH缓冲液洗脱时间应尽可能短,洗脱后用中性缓冲液尽快中和至pH中性,以延长亲和介质的使用寿命。
6、洗脱后,应立刻用如中和缓冲液将收集到的抗体溶液中和到中性(pH7.4左右),以利于维持抗体的生物活性,避免抗体失活。
7、填料使用后应用0.1 M柠檬酸*缓冲液(pH3.0)做再生处理,长期采用极端的洗脱条件将缩短亲和介质的使用寿命。
使用方法:
I 缓冲液的准备
1、平衡缓冲液:20 mM PBS,150 mM NaCl,pH7.4-8.5。
2、洗脱缓冲液:0.1 M Glycine,pH2.5-3.0。
3、再生缓冲液:1 M NaCl。
4、中和缓冲液:1 M Tris-Cl,pH9.0。
注意:
1)以上缓冲液使用前均需0.45μM滤膜过滤。
2)为提高抗体和介质的吸附力。可适当提高平衡缓冲液中的盐浓度和ph值。
II 样本制备
1、样品用平衡缓冲液稀释5-10倍。
2、细胞培养液中大量的血清蛋白会对亲和层析造成一定的干扰,去血清处理或稀释样品将提高纯化抗体收率。
注意:样品在上柱前需0.45μM微孔滤膜过滤。
III 操作步骤
1、将Protein G-Sepharose填料混匀后加入层析柱,室温静置10分钟,待凝胶与溶液分层后,把底部的出液口打开,让乙醇通过重力作用缓慢流出。
2、向装填后的柱中加入3-5个柱床体积的超纯水将乙醇冲洗干净,用平衡缓冲液流洗5-10个柱床体积平衡柱子。
3、将样品上柱,上样流速60 cm/h。
4、平衡缓冲液再洗5-10个柱床体积,直至基线平稳。
5、洗脱缓冲液洗脱,收集洗脱峰,用中和缓冲液将洗脱收集样品中和到中性。
6、立即用5-10个柱床体积平衡缓冲液平衡柱子到中性。
7、再生缓冲液流洗3-5个柱床体积。先后用纯水、20%乙醇分别流洗3-5个柱床体积。柱子置于2~8℃保存。
注意:操作中如果没有实时的蛋白监测系统,收集洗脱峰时可以分阶段收集到多个管中,最后根据测定结果重新调整收集方式。
8、本产品使用10次以上后先用20%乙醇洗5个柱床体积,再用70%乙醇洗脱5-10个柱床体积,再用20%乙醇流洗3-5个柱床体积。柱子置于2~8℃保存。
储存条件:2~8℃,避免冷冻
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·6×UltraStain上样缓冲液
编号:WE0211
英文名称:6×UltraStain Loading Buffer
规格:500μl|500μl×5
本产品在常规6×Loading Buffer中添加了UltraStain染料,该染料是一种生物大分子,不能穿透细胞膜进入细胞内。相对于EB的强诱变性,是一种安全无毒的核酸染料。使用6×UltraStain Loading Buffer替代原始Loading Buffer时,在制胶过程中无需加入EB等核酸染料,只需要将DNA与6×UltraStain Loading Buffer混匀即可进行凝胶电泳。由于UltraStain与EB具有相同的光谱特性,无需改变滤光片及观察装置,在正常紫外光激发检测即可,使用非常方便和灵活。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、由于该染料只需在电泳前与DNA混匀,无需加入凝胶中,可使制备的凝胶保存时间更长。
2、由于Loading Buffer中染料的量远高于将染料加入凝胶中的量,对DNA的灵敏度更高。
操作步骤:
1、配置合适浓度的琼脂糖凝胶
2、吸取5μl DNA样品与1μl 6×UltraStain Loading Buffer混匀后,直接电泳于上样孔内,进行常规电泳和图像采集。

图为向Super DNA Ladder(货号:WE0243)中添加1μl 本产品,在不加染料的TAE缓冲液配置的琼脂糖凝胶中的电泳图
储存条件:2~8℃避光
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·Bes Taq DNA Polymerase
编号:WE0103
英文名称:Bes Taq DNA Polymerase
规格:500U|2500U
Bes Taq DNA Polymerase具有5"→3"DNA聚合酶活性和5"→3"外切核酸酶活性。在普通的PCR条件下,与Taq DNA Polymerase相比,具有扩增效率高、错配率低的优良性能,兼具有Taq DNA Polymerase的高扩增效率和Pfu DNA Polymerase的高保真性。使用本品扩增得到的PCR产物3"端附有一个“A”碱基,因此可直接用于T/A克隆。本产品适用于常规的PCR反应和对保真性有要求的基因克隆等反应。
产品组成:
| 组份 | 500 U | 2500U |
| Bes Taq DNA Polymerase, 5 U/μl | 100μl | 5×100μl |
| 10×PCR Buffer | 1.8ml | 5×1.8ml |
活性定义:
用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74℃,30分钟内,将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为1个活性单位(U)。
质量控制:
1、经过多次柱纯化,SDS-PAGE检测其纯度大于99%;
2、经检测无外源核酸酶活性;
3、PCR方法检测无宿主残余DNA;
4、能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因;
5、室温存放一个月,无明显活性改变。
使用方法:
以下举例为以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系| 试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
| 10×PCR Buffer | 5μl | 1× |
| dNTP Mix,10 mM each | 1μl | 200μM each |
| Forward Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Reverse Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Template DNA | <0.5μg | <0.5μg/50μl |
| Bes Taq DNA Polymerase,5 U/μl | 0.25-0.5μl | 1.25-2.5U/50μl |
| ddH2O | up to 50μl | |
注意:引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。
2、PCR反应条件| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 94℃ | 2min | |
| 变性 | 94℃ | 30s | 25-35个循环 |
| 退火 | 55-65℃ | 30s |
| 延伸 | 72℃ | 30s |
| 终延伸 | 72℃ | 2min | |
注意:
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定,本产品Bes Taq DNA Polymerase的扩增效率为2 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
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