| 保存条件 | 低温运输,-20℃保存 |
| 保质期 | 一年 |
| 英文名 | T7 Endonuclease Ⅰ |
| 数量 | 大量 |
| 供应商 | 联迈生物 |
| 规格 | 250U |
T7核酸内切酶 I产品及特点:
T7 核酸内切酶 I 识别并切割不完全配对DNA、十字型结构 DNA、Holliday 结构或交叉 DNA、异源双链DNA 或者以更慢的速度切割含切刻的双链 DNA。该酶切割错配碱基 5 端的第一、第二或第三个磷酸二酯键。其反应原理图如下:
本产品具体有下列特点:
1. 识别错配 DNA
2. 分解四方向交叉 DNA 或分支 DNA
3. 检测或切割异源二聚体 DNA 和切刻 DNA
4. 随机切割线性 DNA 进行 shot-gun 克隆
T7核酸内切酶 I反应条件
1 X Buffer [50 mM NaCl,10 mM Tris-HCl,10 mM MgCl2 ,1 mM DTT(pH 7.9 @ 25℃) ],37℃ 温育。
单位定义
1 单位指在 50 μl 反应体系,37℃ 条件下,1小时将 90% 以上的 1 μg 超螺旋十字型结构的 pUC (AT) * 转化成 90% 以上的线性结构所需要的酶量。* pUC (AT) 来自 pUC19,在其 EcoRI 和 PstI 位点之间的多克隆位点处有修改。
Buffer 成分
20 mM Tris-HCl,200 mM NaCl,1 mM DTT,0.1 mM EDTA,50%Glycerol,0.15% Triton® X-100,pH 7.5 @ 25℃
备注
T7 核酸内切酶 I 是一种具有底物结构选择性的酶。该酶以不同的活性作用于不同的 DNA 底物。切割特定底物时,必须控制酶量和反应时间。反应温度超过 42 ℃时,会增加非特异性核酸酶活性。