| QYS-23016 | 线粒体呼吸链复合体Ⅲ测定试剂盒 | 微量法 100管/96样 |
| QYS-23017 | 线粒体呼吸链复合体Ⅲ测定试剂盒 | 可见分光光度法 25管/24样 |
测定意义： 线粒体复合体Ⅲ（EC 1.10.2.2）又称 CoQ-细胞色素C 还原酶，广泛存在于动物、植物、微 生物和培养细胞的线粒体中，是线粒体呼吸电子传递链主路和支路的共有成分，负责把还原型 CoQ 的氢传递给细胞色素 C，生成还原型细胞色素 C。
测定原理： 与氧化型细胞色素 C 不同，还原型细胞色素 C 在 550nm 有特征光吸收，因此 550nm 光吸收 增加速率能够反映线粒体复合体Ⅲ酶活性。
样本的前处理： 组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离：
1、 准确称取 0.1g 组织或收集 500 万细胞，加入 1mL 试剂一和 10uL 试剂三，用冰浴匀浆 器或研钵匀浆。
2、 将匀浆 600g，4℃离心 5min。
3、 弃沉淀，将上清液移至另一离心管中，11000g，4℃离心 10min。
4、 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白，可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅲ（此步可选 做）。
5、 步骤④中的沉淀即为线粒体，加入 200uL 试剂二和 2uL 试剂三，超声波破碎（冰浴， 功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10 秒，重复 30 次），用于复合体Ⅲ酶活性测定。
测定步骤：
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 550nm，蒸馏水调零。
2、 样本测定
（1） 工作液的配制：将试剂五转移到试剂四中混合溶解，置于 37℃（哺乳动物）或 25℃（ 其 它物种）孵育 5min；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
（2） 在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 10μL 样本、25μL 试剂六和 200μL 工作液，立 即混匀，记录 550nm 处初始吸光值 A1 和 2min 后的吸光值 A2，计算 ΔA=A2-A1。
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