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960化工网
北京索莱宝科技有限公司
糜蛋白酶活性检测试剂盒 微量法
糜蛋白酶活性检测试剂盒 微量法
价 格：
¥1200
品 牌：
Solarbio
产 地：
北京
最新更新日期：
2021-08-25 10:26
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北京索莱宝科技有限公司
我要认领
公司：
北京索莱宝科技有限公司
联系人：
马金成
联系电话：
010-56371250
联系邮箱：
2748554845@qq.com
QQ：
2748554845
产品属性
保存条件
4℃保存
英文名
Micro Chymotrypsin Assay Kit
数量
99
供应商
北京索莱宝科技有限公司
规格
100管/96样
产品说明
产品名称
:
：
糜蛋白酶活性检测试剂盒
微量法
产品英文名
:
Micro
Chymotrypsin Assay Kit
产品货号：
BC
2335
产地：北京市通州区马驹桥联东
U谷85A三楼
产品规格：
100管/96样
产品商标：
solarbio
保存与运输：
4℃保存或-20℃保存； 参考价格：
1200
库存状态：现货
关键字
:
：
糜
蛋白酶检测试剂盒
|
糜
蛋白酶检测
|
糜
蛋白酶
|试剂盒
简要介绍：
糜蛋白酶，又称胰凝乳蛋白酶，是胰腺分泌的一种蛋白水解酶，能迅速分解变性蛋白质。糜蛋白酶的功能与胰蛋白酶相似，但是具有分解能力强、毒性低和不良反应小等优点。临床上糜蛋白酶用于痰液稀化，对脓性和非脓性痰液均有效；也用于创伤或手术后伤口愈合，如白内障摘除
。
糜蛋白酶
催化
ATEE
水解，产物在
237nm
有特征光吸收；通过测定
237nm
光吸收增加速率，来计算糜蛋白酶活性
。
产品详细描述
产品内容
：
试剂一：液体
×1
瓶，
4
℃保存。
试剂二：粉剂
×1
瓶，
4
℃避光保存。临用前加入
20mL
蒸馏水充分溶解。
产品说明
：
糜蛋白酶，又称胰凝乳蛋白酶，是胰腺分泌的一种蛋白水解酶，能迅速分解变性蛋白质。糜蛋白酶的功能与胰蛋白酶相似，但是具有分解能力强、毒性低和不良反应小等优点。临床上糜蛋白酶用于痰液稀化，对脓性和非脓性痰液均有效；也用于创伤或手术后伤口愈合，如白内障摘除
。
糜蛋白酶
催化
ATEE
水解，产物在
237nm
有特征光吸收；通过测定
237nm
光吸收增加速率，来计算糜蛋白酶活性
。
试验所需自备
仪器
和样品
：
台式离心机、水浴锅、可调式移液器、研钵、紫外分光光度计
/
酶标仪、微量石英比色皿
/96
孔板
(UV
板
)
、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、
粗酶液提取：
组织：按照组织质量（
g
）：试剂一体积（
ml
）
1
：
5-10
的比例（建议称取约
0.1g
组织，加入
1ml
试剂一进行冰浴匀浆。
8
000
g
，
4
℃
离心
10min
，取上清
即粗酶液
。
测定：
1.
分光光度计
/
酶标仪预热
30min
，调节波长到
237nm
，蒸馏水调零。
2.
试剂二置于
37
℃水浴中保温
30min
。
3.
空白管：取微量石英比色皿
/96
孔板，加入
20μL
试剂一，
200μL
试剂二，混匀于
237nm
测定
4min
内吸光值变化，记为
△
A
空白管。（从吸光值稳定增加开始计时）
4.
测定管：取微量石英比色皿
/96
孔板，加入
20μL
粗酶液，
200μL
试剂二，混匀于
237nm
测定
4min
内吸光值变化，记为
△
A
测定管。（从吸光值稳定增加开始计时）
注意：空白管只需要测定一次。
三、糜
蛋白酶活性计算：
a.
使用微量石英比色皿测定的计算公式如下
（
1
）按蛋白浓度计算
活性单位定义：
25
℃每毫克蛋白每分钟催化吸光值增加
1
为一个酶活单位。
糜蛋白酶（
U/mg prot
）
= (
△
A
测定管－
△
A
空白管
) ×V
反总
÷(Cpr×V1)÷T
=2.75×(
△
A
测定管－
△
A
空白管
)÷Cpr
（
2
）按样本质量计算
活性单位定义：
25
℃每克样品每分钟催化吸光值增加
1
为一个酶活单位。
糜蛋白酶（
U/g
）
=(
△
A
测定管－
△
A
空白管
) ×V
反总
÷(W×V1÷V2)÷T
=2.75×(
△
A
测定管－
△
A
空白管
)÷W
W
：样品质量（
g
）；
Cpr
：粗酶液蛋白质浓度（
mg/mL
），需要另外测定；
V1
：加入反应体系中粗酶液体积（
mL
），
20μL=2×10
-2
mL
；
V2
：粗酶液总体积（
mL
），
1 mL
；
V
反总：反应总体积，
220μL=0.22mL
；
T
：反应时间（
min
），
4min
。
b.
使用
96
孔板测定的计算公式如下
（
1
）按蛋白浓度计算
活性单位定义：
25
℃每毫克蛋白每分钟催化吸光值增加
1
为一个酶活单位。
糜蛋白酶（
U/mg prot
）
= (
△
A
测定管－
△
A
空白管
) ×V
反总
÷(Cpr×V1)÷T
=2.75×(
△
A
测定管－
△
A
空白管
)÷Cpr
（
2
）按样本质量计算
活性单位定义：
25
℃每克样品每分钟催化吸光值增加
1
为一个酶活单位。
糜蛋白酶（
U/g
）
=(
△
A
测定管－
△
A
空白管
) ×V
反总
÷(W×V1÷V2)÷T
=2.75×(
△
A
测定管－
△
A
空白管
)÷W
W
：样品质量（
g
）；
Cpr
：粗酶液蛋白质浓度（
mg/mL
），需要另外测定；
V1
：加入反应体系中粗酶液体积（
mL
），
20μL=2×10
-2
mL
；
V2
：粗酶液总体积（
mL
），
1 mL
；
V
反总：反应总体积，
220μL=0.22mL
；
T
：反应时间（
min
），
4min
。
注意事项：
临用前配置的试剂配置好后
3
天内使用完毕。
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