RIPA裂解缓冲液(Western Blot)

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西格
进口、国产
2021-08-25 10:37

上海西格生物科技有限公司

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上海西格生物科技有限公司
韩丽君
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产品属性
数量23
英文名RIPA Lysis Buffer For Western Blot
CAS号详见说明书
保质期详见说明书
供应商上海西格
保存条件低温冷藏
规格100ml
产品说明
RIPA裂解缓冲液(Western Blot)操作步骤:
1、用Hanks液配制0.1%台盼蓝溶液;
2、用0.5%胰蛋白酶:0.2%EDTA=1:1混合液来消化培养的贴壁细胞;
3、再加入适量Hanks液制成细胞悬液;
4、将待染色细胞稀释至所需浓度(方法及浓度范围与细胞计数相同);
5、每0.1ml细胞悬液约加新鲜配制的染液一小滴,室温下染3—5min;
6、染色过的细胞材料,取一滴细胞悬液置玻片上,加盖玻片后放高倍镜下观察;
7、死亡的细胞着浅蓝色并膨大,无光泽。本产品仅供科研活细胞不着色并保持正常形态,有光泽;
8、计数1000个细胞中的活细胞和死细胞数目;
9、统计未染色细胞。可按公式计算出细胞活率

产品名称:RIPA裂解缓冲液(Western Blot)
英文名称:RIPA Lysis Buffer For Western Blot

产品规格:100ml
发货周期:13
对目的蛋白进行检测分析时,总蛋白的提取至关重要,如蛋白提取不好会导致后续试验的不理想甚至失败,如:信号极弱或无杂交信号、背景高、非特异性条带多等.根据目标蛋白的类型和实验应用种类来选择合适的RIPA裂解液,才能大程度地保证后续实验的成功。而RIPA Lysis Buffer For Western Blot对动物组织和细胞的裂解能力极强,它可以完全裂解细胞核和线粒体,并可提取到更多的膜蛋白,从而可获得更多的总蛋白。因其超强的裂解能力,使得大量的基因组DNA从细胞核中释放出来,使蛋白变的十分粘稠,使用Benzonase核酸酶(货号:MT0068)消化可有效解决。经我司RIPA裂解液获得得蛋白可用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度;使用Bradford法测定由本裂解液裂解所得到样品的蛋白浓度会稍有误差。
RIPA裂解缓冲液(Western Blot)
产品特点:
1.可以很好的裂解细胞膜及细胞核,从而更好的完全释放胞浆蛋白、核蛋白和膜蛋白。
2.对于核蛋白,经本品裂解后,核蛋白与粘稠的基因组DNA分离,离心后核蛋白存在于上清中,核蛋白的捕获率高达90%
3.对于膜蛋白,Western Blot RIPA Lysis Buffer可大程度的破坏细胞膜和变性蛋白,使蛋白与膜分离,防止蛋白与膜复合物在离心后沉淀,从而防止蛋白丢失。
4.在提取蛋白过程中,基因组DNA释放使得蛋白提取液变的十分粘稠,使用Benzonase核酸酶消化可有效解决。
储存条件:置于室温阴凉处,可保存2年。
细胞生物学研究有以下几个方面:
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括:
①细胞核、染色体以及基因表达的研究;
②生物膜与细胞器的研究;
③细胞骨架体系的研究;
④细胞增殖及其调控;
⑤细胞分化及其调控;
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡);
⑦细胞的起源与进化;⑧细胞工程.
细胞生物学研究的常用技术有哪些:
1.显微技术:包括显微观察,显微操作.
2细胞组分分析技术:离心分离技术,生物大分子定位技术,定量细胞化学分析技术.
3.细胞工程:细胞培养。
具有显著特点:
灵敏度高,数据可靠,重现性好
操作简便,省时省力
水溶性,不需要换液,尤其适合于悬浮细胞
无需放射性同位素和有机溶剂,对细胞毒性低
为1瓶溶液,毋需预制,即开即用
适合于高通量药物筛选
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录本产品仅供科研
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
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