土壤酸性蛋白酶(S-ACPT)生化检测试剂盒

价格：￥630

品牌：Xkbio

产地：国产

最新更新日期：2021-08-25 12:32

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产品属性

数量

英文名	Soil Acid Protease (S-ACPT) Test Kit

CAS号

无

保质期

1年

供应商	上海晅科生物科技有限公司

保存条件

2-8℃

规格

50管/24样

产品说明

土壤酸性蛋白酶（Solid -Acid Protease，S-ACPT）试剂盒说明书

分光光度法 50 管/24 样

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：

土壤蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物的转化，其水解产物是高等植物的氮源之一。S-ACPT 在酸性环境下催化蛋白质水解，与土壤有机质含量、氮素及其他土壤性质有关。

测定原理：

酸性条件下，S-ACPT 可将酪蛋白水解产生酪氨酸；在碱性条件下，酪氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝；在 680nm 有特征吸收峰。

所需仪器及设备：

可见分光光度计、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、1ml 玻璃比色皿、蒸馏水

试剂组成和配置：

液体一：1mL×1 支，4℃保存。液体二：0.5mL×1 支，4℃保存。
试剂一的配制：临用前按液体一：液体二：蒸馏水=140（μL）：20（μL）：21（mL）的比例配制，现配现用，如出现白色絮状沉淀则不能用。
试剂二：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前加入 6ml 蒸馏水充分溶解待用；用不完的试剂 4℃保存；
试剂三：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前加入 2mL 试剂七，沸水浴加热溶解，然后加入 8ml
试剂一，充分混匀备用，用不完的试剂 4℃保存；
试剂四：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前加入 40ml 蒸馏水充分溶解待用；用不完的试剂 4℃ 保存；
试剂五：液体 10mL×1 瓶，4℃保存；
试剂六：液体 1.5mL×1 支，0.05mg/ml 标准酪氨酸溶液，4℃保存；试剂七：液体 5mL×1 支，4℃保存；

样品处理：

新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干，过 30~50 目筛。

测定操作：

1、试剂一的配制：见试剂的组成和配制。
2、分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 680nm，蒸馏水调零。
3、样本测定：

试剂名称	测定管	对照管
风干土样（g）	0.04	0.04
试剂一（μL）		300
试剂三（μL）	300

试剂二（μL）

100

	测定管	对照管	标准管
上清液（μL）	150	150

混匀后，40℃水浴 30min，振荡 5-6 次，使土样与反应液充分接触混匀，8000g 25℃离心 10min，取上清液，在EP 管中加入下列试剂

试剂六（μL）			150
试剂四（μL）	700	700	700
试剂五（μL）	150	150	150

混匀，40℃水浴 20min，8000g 25℃离心 10min，取上清液，680nm 下读取各管吸光值A
注意：标准管只需测一次。每个测定管设一个对照管。

相关图片：

S-ACPT 活性计算：

单位定义：每天每 g 土样中产生 1mg 酪氨酸为一个 S-ACPT 活力单位。
S-ACPT(mg/d/g 土样)=C 标准×(A 测定管-A 对照管)÷A 标准管×V 反总÷W÷T=24×(A 测定管
-A 对照管)÷A 标准管
C 标准管：标准管浓度，0.05mg/mL；V 反总：反应体系总体积，0.4mL；T：反应时间，
30min=1/48d； W：样本质量，0.04g。