大鼠乳酸脱氢酶(LDH)ELISA试剂盒

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2021-08-25 15:18

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王经理
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产品属性
数量5633
供应商齐一生物科技(上海)有限公司
检测限详细请见说明书
检测方法elisa酶联免疫分析法
应用科研检测
标记物见说明
样本血清,血浆,尿液,胸腹水,脑脊液,细胞培养上清,组织匀浆等
规格48T/96T
产品说明
大鼠乳酸脱氢酶(LDH)ELISA试剂盒试剂盒规 格:96T/48T
试剂盒用于检测标本:血清,血浆,尿液,胸腹水,脑脊液,细胞培养上清,组织匀浆等
检测方法:ELISA
检测类型:酶联免疫夹心法
本产品产品的用途:仅供科研究课题使用 

价格及详细资料:电议,或咨询在线客服QQ,或者以邮件形式发到我司邮箱qysw@qiyibio.com .齐一生物科技(上海)有限公司提供的试剂盒受到了广大科研单位的一致肯定和认同。大品牌保证,价格公道,倾力为国内外科研院校实验室提供最优质的产品。若有需要,我司将竭诚为您服务!
本试剂盒用于测定血清,血浆及相关液体样本中含量。
实验原理: 
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中该产品水平。用纯化的本产品抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入本产品抗原,再与HRP标记的本产品抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的本产品呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中该产品浓度。
试剂盒组成:
试剂盒组成 48孔配置 96孔配置 保存
说明书 1份 1份 
封板膜 2片(48) 2片(96) 
密封袋 1个 1个 
酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
标准品:1800ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存
标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8℃保存
酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
浓缩洗涤液 (20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶 2-8℃保存

大鼠乳酸脱氢酶(LDH)ELISA试剂盒标本要求: 
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤:
1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为1200 ng/L,800 ng/L ,400 ng/L,200ng/L, 100 ng/L)。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟. 
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
注意事项:
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

计算:
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。 
试剂盒性能:
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。
2.批内与批见应分别小于9%和11%
保存条件及有效期:
1.试剂盒保存;2-8℃。
2.有效期:6个月
齐一生物科技有限公司主要经营进口原装Elisa试剂盒,种类齐全,价格实惠,购买我公司产品的新老客户,可享全程技术指导:(包括售前的标本收集,使用过程中不明确地方,实验结束后的数据分析,有任何疑问,我们技术都会即时给您去电)提供免费代测的服务:(您只需把标本寄过来,我们为您节省时间,帮您出结果,原始数据,分析数据均可提供,实验时间五个工作日左右给您结果)可检测人源,小鼠,大鼠,猪,狗,猴,兔,羊,鸡,牛,鸭子,鱼,植物等各种样本。如有什么问题请给我们电话或者留言,告诉我您的需要,并留下您宝贵的意见和建议。
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