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Stable感受态细胞

价格：¥1500 - 4800

品牌：2nd Lab

产地：中国上海

最新更新日期：2021-08-25 21:47

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上海唯地生物技术有限公司

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产品属性

保存条件

-80℃

保质期

6个月

英文名	Stable Electroporation-Competent Cell

数量

大量现货

供应商

唯地生物

CAS号

DE1080

规格	5×50μl/20×50μl

产品说明

Stable 电击感受态细胞产品说明

● 产品说明

Stable电击感受态细胞只能用于电击转化，不可用于热激转化。Stable菌株是NEB公司开发的高转化效率菌株，是逆转录病毒/慢病毒载体系统推荐使用的菌株，具有与Stbl2，Stbl3完全不同的基因型，但是表现出比Stbl2，Stbl3更优异的性能，特别适合慢病毒或具有末端重复序列DNA片段的克隆。基因组含有重组酶recA1 rel A1突变，可有效抑制长片段末端重复区的重组，降低错误重组的概率；同时含有核酸酶endA1突变，避免了提取质粒过程中核酸酶的污染，大大提高了高纯度病毒质粒的产量和质量。lacZΔM15的存在使Stable可用于蓝、白斑筛选，此菌株具有四环素和链霉素抗性，唯地生物开发的Stable电击感受态细胞适用于大质粒的构建或者各种具有末端重复序列的复杂DNA文库构建，经特殊工艺制作，pUC19质粒检测转化效率>2×10¹⁰cfu/μg DNA。

● 产品规格

Stable 电击感受态细胞	50μl/支
pUC19 (对照质粒, 10pg/μl)	10μl
保存条件：	-80℃,6个月

● 注意事项

1. 对不稳定DNA片段的克隆或逆转录病毒/慢病毒载体的构建，涂板后平板应在30℃培养，以减少发生错误重组的概率。
2. 制备高纯度病毒质粒时，应使用新鲜转化的平板接菌，新鲜菌液提取质粒，菌液不可低温保存后提取质粒。
3. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化。插入冰中10分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。混入目的DNA时应轻柔操作。
4. 加入DNA时体积不应大于感受态体积的1/10。
5. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡，气泡会增加弧光放电风险。
6. 当DNA不纯或存在盐，乙醇，蛋白及缓冲液等污染时，转化效率急剧下降。
7. 电击杯里的离子可增加溶液的电导，增大在含有细胞和DNA的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
8. 若转化大质粒或想获得较高转化效率，推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍，转化效率下降一个数量级。
9. 对于连接产物转化，最好转化前乙醇沉淀DNA后用适量TE缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产物，保证DNA浓度不超过100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率，增加弧光放电的风险。
10. 混入质粒时应轻柔操作，吸取感受态细胞时避免用力过猛，以免剪切力过大损伤细胞膜，降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
11. 电击感受态细胞最好保存在-80℃以下，高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。

上海唯地生物技术有限公司，专注成就卓越。

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