SDS-PAGE凝胶制备试剂盒
产品简介 本公司生产的SDS-PAGE凝胶制备试剂盒提供了配制SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂，用户只需自备制胶器具和去离子水，即可配制SDS-PAGE胶。此试剂盒比传统方法操作简单，省时、省力等特点。SDS-PAGE凝胶制备试剂盒不仅可用于配制SDS-PAGE凝胶，也可用于配制非变性PAGE凝胶。
本试剂盒约可配制常规大小、不同浓度的SDS-PAGE胶约40~60块。
根据目的蛋白的分子量大小选择合适的分离胶浓度，见下表。
SDS-PAGE分离胶的浓度与最佳分离范围 | 分离胶浓度 | 最佳分离范围 |
| 15%胶 | 10-40kD |
| 12%胶 | 12-60kD |
| 10%胶 | 20-80kD |
| 8%胶 | 30-90kD |
| 6%胶 | 50-150kD |
温馨提示 0.5g APS加入500ul ddH2O溶解，如果用量极少，可分装-20℃保存；4℃可保存2周。
试剂盒组成| 产品编号 | 包装规格 | 保存条件 |
| A液 | 100ml | 4℃ |
| B液 | 60ml | 4℃ |
| C液 | 60ml | 4℃ |
| APS | 0.1gx3 | 4℃ |
| TEMED | 0.5mlx3 | 4℃ |
| 说明书 | 1 份 |
操作步骤 ：以凝胶规格8.3 x 7.3 cm，梳子厚度0.75mm为例
1、取1.0ml去离子水加入一管APS管中，用移液器轻轻吹打溶解，建议分装后-20℃保存。其10% APS的水溶液不稳定， 4℃可保存两周；-20℃可保存6个月。
2、安装好灌胶膜具，根据目的蛋白分子量大小，选择合适浓度的分离胶（下层胶）和积层胶。
3、按表1配置所需浓度的分离胶（下层胶），将以下液体混匀后，加入已安装好的灌胶模具，留出1.5~2.0cm灌积层胶的空间，用ddH2O加满，防止因氧气扩散进入凝胶而抑制聚合，室温放置30分钟左右凝胶发生凝固，观察水与分离胶之间形成一层分离线，表示凝胶已凝固好；将上层的水用吸水纸吸干。
表1 配制不同浓度的SDS-PAGE分离胶（下层胶）4.0ml
| 成分 | 凝胶浓度所需各成分的体积(ml) |
| 6.0% | 8.0% | 10% | 12% | 15% |
| A液 | 0.80 | 1.07 | 1.33 | 1.60 | 2.00 |
| B液 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 | 1.00 |
| ddH2O | 2.20 | 1.93 | 1.67 | 1.40 | 1.000 |
| APS | 0.03 | 0.03 | 0.03 | 0.03 | 0.03 |
| TEMED | 0.003 | 0.003 | 0.003 | 0.003 | 0.003 |
4、按表2配置积层胶（上层胶），将以下液体混匀后，直接在分离胶上灌注积层胶，插入干净的梳子，小心避免混入气泡。室温放置30分钟左右，凝胶发生凝固。
表2 配制5%浓度的SDS-PAGE积层胶（上层胶）4.0ml| 成分 | 体积（ml） |
| A液 | 0.67 |
| C液 | 1.0 |
| ddH2O | 2.33 |
| APS | 0.03 |
| TEMED | 0.003 |
注意事项 1、如发现凝胶聚合不好，应考虑丢弃使用过的10% APS水溶液，更换新配制的10% APS。
2、SDS-PAGE胶凝聚的速度和温度及催化剂的用量关系密切，在其它条件不变的情况下，可通过改变TEMED的用量，控制凝胶的聚合速度，聚合过快不利于操作。
3、操作中，特别是液体的混匀应尽量避免气泡的产生，给后续的结果造成不必要的麻烦；
4、未聚合的丙烯酰胺有毒，为了您的安全和健康，请穿实验服、戴一次性口罩和手套操作。
