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小鼠大隐静脉内皮细胞提取物

价格：￥800 - 3500

品牌：西格

产地：进口、国产

最新更新日期：2021-08-26 02:29

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上海西格生物科技有限公司

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小鼠大隐静脉内皮细胞提取物

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产品说明

公司产品仅用于科研细胞现货供应，质量有保证、价格优惠、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。

小鼠大隐静脉内皮细胞提取物是从小鼠大隐静脉内皮细胞提取的，小鼠大隐静脉内皮细胞从正常小鼠大隐静脉组织制备。所有的产品在发货之前均经过严格的QA/QC流程以确保其质量。这些产品可以直接用于基因克隆，表达图谱分析以及各种分子生物学实验的研究。
总RNA制备：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol试剂分离RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit进行纯化。生物科技提供的总RNA样品附有RNA样品总浓度、总含量、电泳照片、OD值测定结果等。
cDNA制备：纯化后的总RNA来合成cDNA第一链，以50ul总反应体系进行逆转录，体系中包括MMLV反转录酶和随机引物以及10mg总RNA。68℃反应10min 后终止RT反应。利用1x RT Buffer 运输cDNA，1 ul cDNA 足够做一次PCR反应。所有cDNA产品在订单发货之前都经过了严格的QA/QC分析，保证了产品的质量。
蛋白制备：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制备人关节软骨组织裂解液，离心去除组织碎片，通过Bio-Rad蛋白检测试剂盒测定蛋白浓度，组织蛋白稀释后用非还原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巯基乙醇及PMSF，-80度保存。
潜在的应用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA选择性剪接；<3>基因克隆与目标测序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白检测与蛋白质组学；<6>芯片研究与表达图谱。

产品名称	小鼠大隐静脉内皮细胞提取物
英文名称	Mouse Vascular : Normal Saphenous Vein Endothelial Cell Derivatives
货号	XG-XＰ10895

细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
实验事项：
1.小鼠大隐静脉内皮细胞提取物试剂准备：所有试剂都必须在使用前达到室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。
2. 加样：加样或加试剂时，请注意在吸取标本 / 标准品，酶结合物或底物时，前一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的“预孵育"时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内，如标本数量多，推荐使用多道移液器加样。
3. 孵育：为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜，以避免液体蒸发；洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。
4. 洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响后的酶标仪读数。
5. 试剂配制：Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用，并使用相应的稀释液配制，不能混淆。请确配置标准品及工作液，尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时，一次不要小于10μl)，以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。
6. 反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如，每隔10分钟)，如颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7. 底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射。
建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。
如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请后乘以稀释倍数。

MCF-7/Adr 腺癌/阿霉素耐药株2,7-双(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂戊硼环-2-基)-9,9-二正辛基芴(>98.0%(HPLC))2,7-Bis(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)-9,9-di-n-octylfluorene质量规格：>98.0%(HPLC)
MMP8 Others Mouse 小鼠 MMP-8 / CLG1 人细胞裂解液 (阳性对照) 苯并环丁1(>94.0%(GC))Benzocyclobutene质量规格：>94.0%(GC)
猫肾细胞;CRFK9,9-二甲基-9H-9-硅芴(>98.0%(GC))9,9-Dimethyl-9H-9-silafluorene质量规格：>98.0%(GC)
TNFRSF1A Others Mouse 小鼠 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 人细胞裂解液 (阳性对照) 2,7-二溴菲-9,10-二酮(>97.0%(GC))2,7-Dibromophenanthrene-9,10-dione质量规格：>97.0%(GC)
95-C 低转移肺癌萘-1,4,5,8-四羧酸二酐(>95.0%(HPLC)(T))Naphthalene-1,4,5,8-tetracarboxylic Dianhydride质量规格：>95.0%(HPLC)(T)
SK-OV-3[SKOV-3]细胞，人卵巢癌细胞人支气管上皮细胞,HBE细胞脑膜细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)CLA (>98.0%(HPLC))质量规格：>98.0%(HPLC)CLA
兔角膜前基质层成纤维细胞;RCFBFMCLA (>98.0%(HPLC))质量规格：>98.0%(HPLC)MCLA
TEK Others Human 人 Tie2 / CD202b 人细胞裂解液 (阳性对照) FCLA 自由酸[化学发光试剂]质量规格：化学发光试剂FCLA Free Acid
CL-0143Lncap clone FGC(人前列腺癌细胞)5×106cells/瓶×2红-CLA(含氮量：9.00-10.30 %)质量规格：含氮量：9.00-10.30 %Red-CLA
CTSZ Others Human 人 CTSZ 人细胞裂解液 (阳性对照) 13X分子筛(60-80目,气相、液相色谱柱专用)质量规格：60-80目,气相、液相色谱柱专用Molecular sieves Type 13X
MSC, 小鼠雪旺细胞6-氮杂尿嘧啶shēng huà shì jì容量：RT，避光25克
人类成纤维细胞系;CNLMG-B5537SKIN 人肝动脉内皮细胞完全培养基 100mL茜素 Alizarin,97% 72-48-0 5G 通用试剂
人上皮细胞RNAHMEpiC miRNA5 μg二言醋组安 Histcminq dixy7nochloridq 1926/9/8
PCNA Others Human 人 PCNA 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) LOADINGDYEBASE,25X25X 蛋白电泳上样染料超级暗紫色微粘稠液体RTsigma
非洲绿猴肾细胞;VERO444-94-8儿价级儿流(剧毒)7m7w
小鼠大隐静脉内皮细胞提取物人骨肉瘤细胞;HOS沙格列汀/沙克列汀盐酸盐Saxagliptin HCL质量规格：>98%,BR
REG3G Others Human 人 REG3G / PAP1B 人细胞裂解液 (阳性对照) 表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG95%）EGCG, (-)-Epigallocatechin gallate/Green Tea Extract质量规格：茶多酚≥98%，EGCG≥95%，≤0.1%
胃粘膜上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)达沙替尼一水合物Dasatinib Monohydrate质量规格：>99%,BR,可用于细胞培养
STX8 Others Human 人 STX8 / Syaxin 8 人细胞裂解液 (阳性对照) 依西美坦Exemestane (USP)质量规格：>99%,USP,Aromatase inhibitor
大鼠肝细胞;BRL依西美坦(标准品)Exemestane质量规格：>99%,标准品
培养操作步骤：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。