10000×SuperGreen核酸染料(水溶液)货号:SM107保存条件:4℃避光可保存12个月。 运输条件:常温 产品特点:● 无毒性:SuperGreen 独特的油性和大分子量特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内,艾姆斯氏试验结果也表明,该染料的诱变性远小于EB。● 灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的影响小于SYBR Green I。● 稳定性高:适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶;室温下在酸或碱缓冲液中极其稳定,耐光性强。● 信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。● 操作简单:在预制胶和电泳过程中染料不降解;而电泳后染色过程也只需30分钟且无需脱色或冲洗,即可直接用可见光凝胶透射仪观察。● 适用范围广:可选择电泳前染色(胶染法)或电泳后染色(泡染法);适用于琼脂糖凝胶或SDS-PAGE凝胶电泳;可用于 dsDNA、ssDNA 或 RNA 染色。● 与标准凝胶成像系统以及可见光激发的凝胶观察装置完美兼容:适用于使用254nm 激发的紫外凝胶成像系统或可见光激发的凝胶观察装置。使用方法:1、胶染法(用法同EB)(推荐方法)(1)制胶时加入SuperGreen 核酸染料。(例如:每50mL 琼脂糖溶液中加入5μL SuperGreen 10,000× 储液,以此比例类推)。(2)按照常规方法进行电泳。注意事项: ●此方法染色染料用量相对较少。500 μL染料大约可以做100块 50mL的胶。
●由于SuperGreen 具有良好的热稳定性,可以在热的琼脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷却。摇晃,振荡或者翻转以保证染料充分混匀。也可以选择将SuperGreen 储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中,然后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。SuperGreen 兼容所有常用的电泳缓冲溶液。
●如果总是看到条带弥散或分离不理想,建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。如果染色后问题依旧存在,则说明问题与染料无关,请尝试:降低琼脂糖浓度;选用更长的凝胶;延长凝胶时间以保证边缘清晰;改进上样技巧或选择泡染法染色。
●此方法不适合预制SDS-PAGE凝胶,对于SDS-PAGE凝胶请使用泡染法。
2、泡染法(1)按照常规方法进行电泳。(2)用H2O将SuperGreen 10,000× 储液稀释约3,300倍到0.1M NaCl中,制成3× 染色液。(例如将15μL SuperGreen 10,000× 储液和5mL 1M NaCl加到45mL H2O中)。(3)将凝胶小心地放入合适的容器中,如聚丙烯容器中。缓慢加入足量的3× 染色液浸没凝胶。室温振荡染色30min左右。注意事项: ●用泡染法染色时,染料用量较多。单次使用的染色液可重复使用3次左右。
●3× SuperGreen 染色液可以大量制备,在室温下避光保存直至用完。