细胞培养技术服务

1、 细胞培养服务流程

① 从动物组织切割、分离所需培养的组织(原代培养);

② 用灭菌PBS多次清洗组织，充分剪碎组织，用灭菌PBS清洗组织;

③ 静置数分钟，使组织沉淀于管底，弃上清;

④ 胰蛋白酶充分消化组织，弃上清;

⑤ 加入含小牛血清或胎牛血清的培养基，置于CO2培养箱培养;

⑥ 从CO2培养箱取出生长状态良好的单层原代培养细胞或传代培养细胞，于超净工作台中弃去培养液，用灭菌PBS清洗;

⑦ 加入适量胰蛋白酶消化液，静置片刻;

⑧ 倒置显微镜下观察细胞消化状态，如变圆，立即弃去消化液，加入培养液终止消化;

⑨ 终止培养，去除培养上清液;

⑩ 反复吹打培养液，制成单细胞悬液，分置于多个细胞培养瓶/皿，进行传代培养;

注：①～⑤为原代细胞培养主要步骤，⑥～⑩为传代细胞培养主要步骤。