特别提示:包括dATP溶液(100mM)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:dATP溶液(100mM)
英文名称:dATP Solution
产品货号:YT385
产品规格:250μl
ATP即2"-deoxyadenosine 5"-triphosphate,中文名为脱氧腺苷三磷酸,常用于PCR、real-time PCR、RT-PCR、cDNA或普通DNA合成、引物延伸反应、DNA测序、DNA标记等各种常规分子生物学反应。
分子式:C10H13N5O12P3Na3
分子量:557.2(酸形式的分子量为491.2)
dATP的zuì大吸收波长:259nm
本dATP溶液用超纯水配制,并用高纯度NaOH溶液调节pH值至7.0,浓度为100mM,即100mmol/L。
本dATP溶液不含DNase、RNase、phosphatase和蛋白酶。
本dATP溶液经测试,可以直接用于PCR等各种常规分子生物学反应。
储存条件:-20℃。
除了dATP溶液(100mM),,我公司还供应以下相关产品:
名称:PCR抑制物清除剂
货号:BTN60804
规格:1mL
用血液、土壤、植物、中药材等样品中提取的DNA 经常含有会抑制PCR的产物。本产品专门用于解除这些PCR 抑制剂的抑制作用,使DNA 能够用于PCR扩增。
产品特点:1. 使用简单,直接加入PCR反应体系中使用。
2.适用范围广,可以用于解除血液、土壤、植物、中药材等DNA样品中的PCR 抑制剂。
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:将本产品按1:10的比例加入到PCR反应体系中即可进行PCR,如果PCR反应体系为50μL,则需要加本产品5μL。
名称:核酸稀释液,测OD专用
货号:BTN131179
规格:250mL
测定核酸的OD需要一定的pH和盐浓度,本产品就是根据这一特点开发的、专门用于溶解和稀释核酸样品的溶液。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
名称:NTP溶液(10mM)
货号:BTN70906
规格:0.5mL
本产品是ATP、UTP、GTP、CTP四种核苷酸的混合液,每种核苷酸的浓度为10mM,纯度在98%以上(HPLC检测),不含DNA内切酶、DNA外切酶、RNA酶和磷酸酶的污染,可以直接用于体外RNA转录合成。使用浓度请参考相关手册。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期两年。
NTP的分子结构

名称:dNTP混合溶液(25mM)
货号:YT391
规格:250μl
本dNTP Mixture为dATP、dCTP、dGTP和dTTP的混合溶液,每种的浓度均为25mM,适合用于PCR、real-time PCR、RT-PCR、cDNA或普通DNA合成、引物延伸反应、DNA测序、DNA标记等各种常规分子生物学反应。
本dNTP溶液用超纯水配制,并用高纯度NaOH溶液调节pH值至7.0,浓度为25mM each,即dATP、dCTP、dGTP和dTTP的浓度均为25mmol/L。
本dNTP溶液不含DNase、RNase、phosphatase和蛋白酶。
本dNTP溶液经测试,可以直接用于PCR等各种常规分子生物学反应。
储存条件:-20℃。
名称:实时荧光定量PCR的预混体系(探针法)(低含量ROX校正染料)
货号:WE0145
规格:5ml
本品是专用于探针法(TaqMan,Molecular Beacon等)实时荧光定量PCR的预混体系,浓度为2×,包含BaldStar Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs和Mg2+,操作简单方便。主要用于基因组DNA靶序列和RNA反转录后cDNA靶序列检测,如基因表达分析,拷贝数分析,SNP基因型分析等,适用于不同类型探针法荧光定量。本品含有的BaldStar Taq DNA Polymerase是一种经化学修饰的、全新高效热启动酶,在常温下没有聚合酶活性,有效避免了在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增,酶的激活须在95℃下孵育10分钟。独特的PCR缓冲体系与热启动酶的组合,显著提高了PCR的扩增效率,荧光信号更强,灵敏度更高,可以检测单拷贝的模板。使用本产品可以得到更广的线性范围,对目的基因定量更准确。适用于无需ROX作为校正染料的所有荧光定量PCR仪。
ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差,一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同,因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
不需要ROX校正的仪器(WE0144):
Roche LightCycler 480,Roche LightCyler 96,Bio-rad iCyler iQ,iQ5,CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器(WE0145):
ABI Prism7500/7500 Fast,QuantStudio® 3 System,QuantStudio® 5 System,QuantStudio® 6 Flex System,QuantStudio® 7 Flex System,ViiA 7 system,Stratagene Mx3000/Mx3005P,Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器(WE0146):
ABI Prism7000/7300/7700/7900,Eppendorf,ABI Step One/Step One Plus等。
产品组成:
| 组份 | WE0144-5ml | WE0145-5ml | WE0146-5ml |
| 2×BaldStar TaqMan Mixture | 5×1ml | 5×1ml | 5×1ml |
| 50×Low ROX | - | 200μl | - |
| 50×High ROX | - | - | 200μl |
| ddH2O | 5×1ml | 5×1ml | 5×1ml |
注意事项:
1.使用前请上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。
2.避免反复冻融本品,反复冻融可能使产品性能下降。本产品长期保存可置于-20℃,避光。如果在短期内需要频繁使用,可在2~8℃保存。
使用方法:
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系:
| 试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
| 2×BaldStar Taq Man Mixture | 25μl | 1× |
| Forward Primer,10μM | 1μl | 0.2μM |
| Reverse Primer,10μM | 1μl | 0.2μM |
| Probe,10μM | 1μl | 0.2μM |
| Template DNA | 2μl | |
| 50×Low ROX or High ROX(可选) | 1μl | 1× |
| ddH2O | up to 50μl | |
注意:
1)通常引物浓度以0.2μM可以得到较好结果,可以在0.1-1.0μM作为设定范围的参考。
2)使用的探针浓度,与使用的荧光定量PCR仪、探针种类、荧光标记物质种类有关,实际使用时请参照仪器说明书,或各荧光探针的具体使用要求进行浓度的调节。
3)通常DNA模板的量以10-100ng基因组DNA或1-10ng cDNA为参照,因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同,可对模板进行梯度稀释,以确定zuì佳的模板使用量。
4)不同仪器的激发光学系统有所不同,根据使用荧光定量的仪器选择加入50× Low ROX or 50×High ROX。
2、PCR反应程序:
注意!本产品预变性反应必须在95℃ 10分钟下完成!
两步法PCR:
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 10 min | |
| 变性 | 95℃ | 15 s | 35-40个循环 |
| 退火/延伸 | 60℃ | 1 min |
注意:
1)本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、10 min条件下实现酶的活化。
2)建议采用两步法PCR反应程序,若因使用Tm值较低的引物等原因,得不到良好的实验结果时,可尝试进行三步法PCR扩增,退火温度请以 56℃-64℃的范围作为设定参考。
储存条件:-20℃,避免反复冻融