土壤过氧化氢酶(S-CAT)测试盒

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2021-08-27 02:38

上海晅科生物科技有限公司

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上海晅科生物科技有限公司
朱经理
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产品属性
数量100
英文名Soil catalase (S-CAT) test kit
CAS号
保质期1年
供应商上海晅科生物科技有限公司
保存条件2-8℃
规格100管/48样
产品说明


土壤过氧化氢酶(Solid-CatalaseS-CAT)试剂盒说明书

微量法 100 管/48 样

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义:

S-CAT 是土壤微生物代谢的重要酶类,在H2O2清除系统中具有重要作用。

测定原理:

H2O2240nm 下有特征吸收峰,通过测定与土壤反应后溶液在此波长下吸光度的变化,即可反应 S-CAT 活性的高低。

需自备的仪器和用品:

紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板UV 板)和蒸馏水

试剂组成和配制:

试剂一:液体 300μL×1 瓶,4℃保存;临用前加入 29.7mL 蒸馏水充分溶解后待用;用不完的试剂 4℃保存;
试剂二:粉剂×1 瓶,4保存;临用前加入 1mL 蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂 4保存(如出现结晶析出,60-90水浴溶解后使用
试剂三:液体 3mL×1 瓶,4℃保存。

样品处理:

新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干,过 30~50 目筛。

测定步骤:

1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 240nm,蒸馏水调零。
2、 测定前务必准备 96 UV 板一块UV 板不是普通酶标板,普通酶标板只能透过可见光, 不能透过紫外光,检测波长小于 340nm 务必使用 UV
3、 加样表
试剂名称测定管无基质管无土管
风干土样(g0.030.03
试剂一(μL260260
蒸馏水(μL260
25℃振荡培养 20min
试剂二(μL101010
试剂三(μL202020
混匀 8000g25离心 5min,取 180uL 上清混匀, 240nm 处记录各管吸光值 A注意:每个测定管要设一个无基质管,无土管只要做一管。

相关图片:
S-CAT 活性计算:
  1. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
单位的定义:每天每 g 风干土样催化 1μmol H2O2降解定义为一个酶活力单位。
计算公式:S-CATμmol/d/g)=[(A 无土管-A 测定管+A 无基质管)×V 反总÷ε×d
×106]÷W÷T=16.5×A 无土管-A 测定管+A 无基质管)
V 反总:反应体系总体积,3×10-4 Lε:过氧化氢摩尔消光系数,4.36×104 L / mol /cmd: 比色皿光径,1cmT:反应时间,20 min=1/72dW:样本质量,0.03g
  1. 96 孔板测定的计算公式如下
单位的定义:每天每 g 风干土样催化 1μmol H2O2降解定义为一个酶活力单位。
计算公式:S-CATμmol/d/g)=[(A 无土管-A 测定管+A 无基质管)×V 反总÷ε×d
×106]÷W÷T=33×A 无土管-A 测定管+A 无基质管)
V 反总:反应体系总体积,3×10-4 Lε:过氧化氢摩尔消光系数,4.36×104 L / mol /cmd96 孔板光径,0.5cmT:反应时间,20 min=1/72dW:样品质量,0.03g