人肾系膜细胞培养试剂盒【Human Kidney PrimacellTM：Normal Renal Mesangial Cells】价格,详情介绍-960化工网

人肾系膜细胞培养试剂盒【Human Kidney PrimacellTM：Normal Renal Mesangial Cells】

价格：¥800 - 4500

品牌：上海抚生

产地：进口/国产

最新更新日期：2021-08-27 18:38

我要询单 QQ交流

上海抚生实业有限公司

我要认领

公司：上海抚生实业有限公司

联系人：刘小姐

联系电话： 18201748966 021-52961052

联系邮箱：3004922566@qq.com

QQ： 3004922566

产品属性

品系

咨询在线客服

ATCC Number

Human Kidney PrimacellTM：Normal Renal Mesangial Cells

细胞类型

咨询在线客服

肿瘤类型

咨询在线客服

供应商

上海抚生

数量

生长状态

贴壁

年限

咨询在线客服

运输方式

复苏/冻存

器官来源

咨询在线客服

是否是肿瘤细胞

咨询在线客服

细胞形态

贴壁

免疫类型

咨询在线客服

物种来源

咨询在线客服

相关疾病

咨询在线客服

组织来源

咨询在线客服

CAS号

咨询在线客服

英文名	Human Kidney PrimacellTM：Normal Renal Mesangial Cells

注册证号

咨询在线客服

规格	1.25ML/1.5ML

产品说明

产品说明
人肾系膜细胞培养试剂盒【Human Kidney PrimacellTM：Normal Renal Mesangial Cells】
人肾系膜细胞属于血管周细胞，位于肾小球毛细血管袢之间。其中，系膜细胞有多种生理功能包括和分泌系膜基质，胞吞和加工血浆大分子，通过系膜细胞收缩和分泌血管活性激素控制肾小球血流动力学。肾系膜细胞增生和基质的过多产生是多种肾小球肾炎的主要病理表现，如IgA肾病，狼疮性肾炎，糖尿病肾病以及在肾小球硬化过程中细胞外基质增加。在培养中细胞增殖和基质合成/降解是通过细胞因子和生长因子调控的，因此细胞培养是研究系膜扩张、瘢痕形成和肾小球硬化的理想方法。虽然肾系膜组织机械韧性很强，但利用本公司试剂盒中提供的肾系膜组织分离ȂȂȂȂȂȂȂȂȂȂȂȂȂȂȂȂȂȂ#ᘀ
实验报告
一、人肾系膜细胞培养试剂盒【Human Kidney PrimacellTM：Normal Renal Mesangial Cells】分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗（Abbioscience公司），然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗（嘉美生物公司）， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜(Leica公司)下观察图像并拍照。
传代细胞培养
人肾系膜细胞培养试剂盒【Human Kidney PrimacellTM：Normal Renal Mesangial Cells】(一)原理：体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后，由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭，将培养的细胞分散，从容器中取出，以1:2或l:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为传代培养。
细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间，与细胞世代或倍增不同。在一代中，细胞培增3～6次。细胞传代后，一般经过三个阶段：游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度，即细胞群的分裂相数／100个细胞。一般细胞分裂指数介于0.2％～0.5％，肿瘤细胞可达3～5％。细胞接种2～3天分裂增殖旺盛，是活力最好时期，称指数增生期(对数生长期)，适宜进行各种试验。

(二)操作：
1.将长成单层的原代培养细胞或HeLa细胞从二氧化碳培养箱中取出，在超净工作台中倒掉瓶内的培养液，加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜)，静置5～10分钟。
2.在倒置镜下观察被消化的细胞，如果细胞变园，相互之间不再连接成片，这时应立即在超净台中将消化液倒掉，加入3～5ml新鲜培养液，吹打，制成细胞悬液。
3.将细胞悬液吸出2ml左右，加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加3ml左右培养液，盖好瓶塞，送回二氧化碳培养箱中，继续进行培养。
(三)结果:一般情况，传代后的细胞在2小时左右就能附着在培养瓶壁上，2～4天就可在瓶内形成单层，需要再次进行传代。
原代细胞培养
人肾系膜细胞培养试剂盒【Human Kidney PrimacellTM：Normal Renal Mesangial Cells】(一)原理：细胞培养(Cell culture)是模拟机体内生理条件，将细胞从机体中取出，在人工条件下使其生存、生长、繁殖和传代，进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研究。近年来，广泛地应用于分子生物学、遗传学、免疫学、肿瘤学、细胞工程等领域，发展成一种重要生物技术，并取得显著成就。由体内直接取出组织或细胞进行培养叫原代培养。原代培养细胞离体时间短，性状与体内相似，适用于研究。一般说来，幼稚状态的组织和细胞，如：动物的胚胎、幼仔的脏器等更容易进行原代培养。
(二)操作：
1．取材：用颈椎脱位法使乳兔迅速死亡。然后，把整个动物浸入盛有75％乙醇的烧杯中数秒钟消毒，取出后放在大平皿中携入超净台。用消过毒的剪刀剪开用和乙醇再次消毒后的皮肤，剖腹取出肝脏或肾脏。置于无菌平皿中。
2．切割：用灭菌的PBS液将取出的脏器清洗三次，然后用眼科手术剪刀仔细将组织反复剪碎，直到成1mm3左右的小块，再用PBS清洗，洗到组织块发白为止。移入无菌离心管中，静置数分钟，使组织块自然沉淀到管底，弃去上清。
3．消化、接种培养：吸取0.25％胰蛋白酶一0.02％混合消化液1ml，加入离心管中，与组织块混匀后，加上管口塞子，37℃水浴中消化8～10分钟，每隔几分钟摇动一下试管，使组织与消化液充分接触，静止，吸去上清，向离心管中加入5～10ml含5％小牛血清的MEM培养基，用吸管吹打混匀，移入二个培养瓶中，置于二氧化碳培养箱中培养。
(三)结果：细胞接种后一般几小时内就能贴壁，并开始生长，如接种的细胞密度适宜，5天到一周即可形成单层。
人肾系膜细胞培养试剂盒【Human Kidney PrimacellTM：Normal Renal Mesangial Cells】相关产品：
现货供应　HSAEpiC cDNA　人小气道上皮细胞cDNA 规格:
现货供应　HPF cDNA　人肺成纤维细胞cDNA 规格:
现货供应　HBSMC cDNA　人支气管平滑肌细胞cDNA 规格:
现货供应　HTSMC cDNA　人气管平滑肌细胞cDNA 规格:
现货供应　HSkMC cDNA　人骨骼肌细胞cDNA 规格:
现货供应　HSkMSC cDNA　人骨骼肌卫星细胞cDNA 规格:
现货供应　HSkMM cDNA　人骨骼肌成肌细胞cDNA 规格:
细胞色素B还原酶1抗体,特价促销,请询价
2号染色体开放阅读框76抗体,特价促销,请询价
卷曲螺旋结构域蛋白60抗体,特价促销,请询价
卷曲螺旋结构域蛋白144A抗体,特价促销,请询价
周期素B3抗体,特价促销,请询价
卷曲螺旋结构域蛋白120抗体,特价促销,请询价
周期素D结合蛋白1抗体,特价促销,请询价
卷曲螺旋结构域蛋白23抗体,特价促销,请询价
卷曲螺旋结构域蛋白89抗体,特价促销,请询价
人肾系膜细胞培养试剂盒【Human Kidney PrimacellTM：Normal Renal Mesangial Cells】5-尿苷三磷三盐　5克　进口/国产
5-尿苷二磷二盐　1克　进口/国产
5-尿苷二磷　25克　进口/国产
5-鸟苷一磷二盐　25克　进口/国产
5-鸟苷三磷三盐　100克　进口/国产
5-鸟苷三磷二盐　25克　进口/国产
5-鸟苷二磷二盐　5克　进口/国产
5-氯代水杨　25克　进口/国产
5-肌苷一磷二盐　1克　进口/国产
5-肌苷三磷三盐　250克　进口/国产
5-肌苷二磷三盐　50克　进口/国产
5-核黄素磷盐二水物　17.5KU　进口/国产
5-核黄素磷盐　1KU　进口/国产
5-氟乳清　500毫克　进口/国产
5-氟尿嘧　100克　进口/国产

960化工网为您提供人肾系膜细胞培养试剂盒【Human Kidney PrimacellTM：Normal Renal Mesangial Cells】的专业供应商信息，包括公司名称，地址，手机，电话，以及该供应商的其他产品和相关产品。