| 规格 | 1000次 |
Kinase-Lumi™增强型化学发光法激酶活性检测试剂盒(Kinase-Lumi™ Plus Luminescent Kinase Assay Kit),是一种通过化学发光法测定激酶反应后溶液中ATP的剩余量(最高可达50μM)来定量检测激酶活性的试剂盒。本试剂盒也可用于检测任何消耗ATP的酶,例如ATPase。
本试剂盒可以检测反应体系中浓度最高为50μM的ATP,并在0-50μM范围内有良好的线性关系。对于更低浓度的ATP可以选购检测浓度上限为10μM的Kinase-Lumi™化学发光法激酶活性检测试剂盒(Kinase-Lumi™ Luminescent Kinase Assay Kit)。对于更高浓度的ATP,可以选购检测浓度上限为200μM的Kinase-Lumi™超强型化学发光法激酶活性检测试剂盒(Kinase-Lumi™ Max Luminescent Kinase Assay Kit)或者需要适当稀释后再进行检测。另外两个试剂盒分别在0-10μM和0-200μM范围内有良好的线性关系。
本试剂盒应用范围广,适用于各类消耗ATP的激酶,包括以蛋白或多肽为底物的蛋白激酶和以糖、脂、醇等为底物的非蛋白激酶。本试剂盒也同样适用于检测消耗ATP的ATPase。
本试剂盒的检测激酶活性的原理参考图1。激酶在反应过程中催化ATP上的磷酸基团转移到底物的羟基上,从而使ATP转变为ADP,这样就可以根据ATP的减少量来定量激酶的活性。借助ATP依赖的萤光素酶(也称荧光素酶)催化的萤光素发光反应,ATP可以通过测定化学发光来进行定量。这样就可以通过设置ATP的标准曲线,来定量激酶反应体系中的ATP剩余量,从而计算出ATP的消耗量,最终计算出激酶的活性。激酶的活性和ATP的剩余量成反比,即激酶活性越高,ATP剩余量越少,发光值越低;反之,激酶活性越低,ATP剩余量越多,发光值越高。


图1. 本试剂盒检测激酶活性的原理图。
本试剂盒的使用非常便捷,对于待测样品仅需加入等体积的检测试剂即可完成检测反应,并且检测反应可以仅在一个孔内完成。本试剂盒不仅适合少量样品的检测,也非常适合大量样品的高通量筛选(high-throughput screening)检测。
本试剂盒不仅操作特别方便,并且由于使用了热稳定的萤火虫萤光素酶并对反应体系进行了优化,检测体系的发光信号也非常稳定。加入检测试剂后10分钟即可产生非常稳定的化学发光,30分钟内化学发光的下降通常不会超过10%。
对于96孔板,我们推荐使用50μl激酶反应体系和50μl的检测试剂,总体积为100μl,此时本试剂盒可以进行200或2000次检测。对于384孔板,我们推荐使用10μl激酶反应体系和10μl的检测试剂,总体积为20μl,此时本试剂盒可以进行1000或10000次检测。也可以用其它体积,但激酶反应体积和检测试剂体积的比例必须为1:1。
包装清单:
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| S0155M | Kinase-Lumi™增强型化学发光法激酶活性检测试剂盒 | S0155S×10 |
| — | 说明书 | 1份 |
保存条件:
-20℃保存,半年有效。-80℃保存,一年有效。检测试剂需避光保存。