"MDCK 犬肾贴壁细胞
GD-C0228632B65501
【冻存细胞操作】１)选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前１d换液；２)按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达５×１０(７)/ml左右密度，离心，去上清；３)加入配制好的冻存液(培养液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂１０％二甲基亚砜(DMSO) 或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外；４)分装于无菌冻存管中，每管加１.５m悬液；５)旋好冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做好标记；６)冻存：在特殊的仪器或简易的液氮容器中，按-１℃/min的速度，在３０～４０min时间内，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。【复苏细胞操作】１)从罐中取出冻存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不时摇动，使其急速融化，３０～６０s内完成；３)冻存管用７０％酒精擦拭消毒后，打开盖子，用吸管将细胞悬液注入离心管中，再滴加１０ml培养液；４)低速离心(５００～１０００r/min) ５min，去上清后再用培养液洗一次；５)用培养液适当稀释后，装入培养瓶３７℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分，密度应达到１０(７)/ml，在融后稀释２０倍时，仍能保持５×１０(５)/ml数量。
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
PG-BE１实验细胞冻存平台；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
HEp-２实验细胞保种中心；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：１：２传代
ACC-３细胞复苏中心；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：消化３-５分钟。１：２。３天内可长满。
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
MDCK 犬肾贴壁细胞
细胞传代培养的胰酶消化法：传代培养：是指细胞从一个培养瓶以１：２或１：２以上的比例转移，接种到另一培养瓶的培养。传代细胞，可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代，部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代，或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。实验步骤：①入无菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒双手；②倒置显微镜下观察细胞形态，确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液３７℃下预热；③超净台台面应整洁，用７５%酒精棉球擦拭清洁；④打开超净工作台的紫外灯照射台面２０min左右，关闭紫外灯，打开风机清洁空气除去臭氧；⑤点燃酒精灯;取出无菌试管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内；⑥将培养用液瓶口用７５%酒精消毒，过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上；⑦倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去残留的就培养基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每个大培养瓶加入１ml胰酶，小培养瓶用量酌减，盖好瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶，使细胞脱离胰酶，然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鲜培养基，反复吹打消化好的细胞使其脱壁并分散，再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成细胞悬液，然后分装到新培养瓶中。盖好瓶盖，适度拧紧后稍回转，以利于CO２的进入，将培养瓶放回CO２培养箱；⑩对悬浮培养细胞，步骤７-９不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清，加入新鲜培养基，然后分装到各瓶中。
细胞传代方法：１：２传代
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
贴壁细胞传代：去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4 ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min 室温离心5min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良好，当补液时，需避免反复吹打。
HVT细胞保种中心；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
PG-４细胞保种平台；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
NCI-H７４０[H７４０]细胞冻存中心；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
Human Fibroblasts细胞冻存平台；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
NHRF细胞保藏中心；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞生长特性：贴壁生长　
MDCK 犬肾贴壁细胞
细胞形态特性：详见细胞说明书
２２(H２２)细胞系；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２传代
MOPC细胞；细胞生长特性：半贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
B１０BR细胞株；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
NTera-２ Cell；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
Hela ２９９ Cells；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
HSC-６ Cell line；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
Mo７e有限细胞；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
sf９细胞科研实验平台；细胞生长特性：混合生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：１：５传代；２-３天换液１次。
VMM５A实验细胞复苏中心；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
NCI-H１６５１[H１６５１]实验细胞复苏平台；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
SMC-１实验细胞冻存中心；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
WSU-DLCL２细胞保藏平台；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
SW１１６传代细胞复苏中心；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
NCI-H８４１[H８４１]传代细胞复苏平台；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
VERO C１００８传代细胞实验中心；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
SW９００传代细胞实验平台；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
SW８３７[SW-８３７]传代细胞保种中心；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
VK２/E６E７传代细胞保种平台；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
F-３６P传代细胞保藏中心；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：每周２次换液
２E８传代细胞保藏平台；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：淋巴母细胞样　；细胞传代方法：２-４天换液１次。
IEC-６[IEC６]传代细胞国内复苏中心；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
DSL-６A/C１传代细胞国内复苏平台；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
MDCK 犬肾贴壁细胞
ARPE-１９传代细胞国内保种中心；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：１：２传代
NCI-H１８８２[H１８８２]传代细胞国内保种平台；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
HOPC传代细胞；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
SNU-８８６贴壁细胞；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２传代
BGC８２３四代细胞；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
Anip９７３复苏细胞；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
CAL-１２０冻存细胞；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
KATOIII细胞实验室；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
MDCK-II实验细胞保种中心；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：１：３传代，３-４天传１次
HUTU-８０细胞复苏中心；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
HCFB细胞保种中心；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
Hep-G２细胞保种平台；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
SNU-３９８细胞冻存中心；细胞生长特性：混合生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：１：３-１：６传代；２-３天换液１次。
SW １２７１[SW-１２７１,SW１２７１]细胞冻存平台；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
IPI-２I细胞保藏中心；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
A-６７３细胞保藏平台；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
SP２/MIL-６传代细胞复苏中心；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：淋巴母细胞样；细胞传代方法：１：２传代
HIC-２传代细胞复苏平台；细胞生长特性：贴壁生长　；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２传代
３３６０４传代细胞实验中心；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
G４０１传代细胞实验平台；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
COLO-１６传代细胞保种中心；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
THC８３０７传代细胞保种平台；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
GLAG-６６传代细胞保藏中心；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
SCC-９传代细胞保藏平台；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：１：２传代
SGC７９０１传代细胞国内复苏中心；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
ISK传代细胞国内复苏平台；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
２V６.１１传代细胞国内保种中心；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
T-４７D传代细胞国内保种平台；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
HuUMSCs-１１传代细胞；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
HuUMSCs-１１贴壁细胞；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
B６Tert-１四代细胞；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
SW７５６复苏细胞；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
KYSE５０冻存细胞；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
SACC-LM细胞实验室；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
RGM-１细胞实验中心；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
SW４８细胞实验平台；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：１：３传代,２-３天传一代
COLO８２９传代细胞国内实验平台；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
ECV-３０４传代细胞权威复苏中心；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
RL９５-２传代细胞权威复苏平台；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：１：２传代
C３H/１０T１/２,Clone８传代细胞权威实验中心；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
MEF(CF-１)传代细胞权威实验平台；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
H-４-II-E传代细胞权威冻存中心；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
Mouse podocyte传代细胞权威冻存平台；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
MSTO-２１１H传代细胞权威保藏中心；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞样；细胞传代方法：消化３-５分钟。１：２。３天内可长满。
SCH传代细胞权威保藏平台；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
HEEpiC细胞专业复苏中心；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
MDCK 犬肾贴壁细胞
PIG１细胞专业复苏平台；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
WEHI-３B细胞专业实验中心；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
OAW４２细胞专业实验平台；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
MFC细胞专业冻存中心；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
NCI-H９２０细胞专业冻存平台；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
QBI-２９３A细胞专业保种中心；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
Colo７３８细胞专业保种平台；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
A-４２７细胞专业保藏中心；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
SW ９５４[SW-９５４,SW９５４]细胞专业保藏平台；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
VCaP细胞科研复苏中心；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：消化３-５分钟。１：２。３天内可长满。
SCC-２５细胞科研复苏平台；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
２９３A细胞科研冻存中心；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
DF-１细胞科研冻存平台；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
rRTEC细胞科研实验中心；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
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