细胞衰老检测试剂盒 - SPiDER-βGal价格,详情介绍-960化工网

细胞衰老检测试剂盒 - SPiDER-βGal

价格：¥4580

品牌：dojindo

产地：美国

最新更新日期：2021-08-31 21:03

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上海研卉生物科技有限公司

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产品属性

英文名	Cellular Senescence Detection Kit - SPiDER-βGal

供应商

研卉生物

规格	10assays (35mm dish)

产品说明

细胞衰老检测试剂盒 - SPiDER-βGal
Cellular Senescence Detection Kit - SPiDER-βGal

《原理》

图1 用SPiDER-βGal检测衰老细胞的原理

正常细胞的DNA损伤是由细胞的不断分裂和氧化应激引起。细胞衰老是一种不可逆的细胞生长抑制状态，它可以抑制DNA受损细胞的生长。细胞衰老β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)在衰老细胞中过表达，被广泛作为细胞衰老的标识之一。用X-Gal染色检测SA-β-gal是一种常用的方法，但此方法存在3个缺点；

1) 由于细胞透膜性差，需要固定细胞

2) 由于很难区分染色细胞和未染色细胞，所以定量困难

3) 染色时间长

本试剂盒检测SA-β-gal灵敏度高、方法简便。SPiDER-βGal是一种检测SA-β-gal的新型试剂，具有细胞透膜性高、细胞内荧光持续时间长的特点。SA-β-gal不仅在固定细胞中被检测到，也可以在活细胞中被特异性地检测到（用Bafilomycin A1抑制内源性β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)的活性后）。因此可用SPiDER-βGal来进行定量分析。

《实验例1》

SA-β-gal与DNA损伤标志物γ-H2AX共染色

1、将传代1次与10次的细胞孵育在38孔板中，其余以操作手册为准

2、添加4% PFA/PBS于细胞中，室温孵育15 min后，PBS清洗细胞3次。

3、添加0.1% Triton X-100/PBS于细胞中，室温孵育30 min后，PBS清洗细胞3次。

4、添加1% BSA/PBS于细胞中，室温孵育1 h。

5、添加1% BSA/PBS稀释的抗γ-H2AX抗体（兔），4℃下孵育过夜后，PBS清洗细胞3次。

6、添加1% BSA/PBS稀释的荧光二抗（Alexa Fluor 647）于细胞中，室温孵育2h后，PBS清洗细胞3次。

7、添加浓度为2 μg/ml DAPI (code: D523)的PBS溶液于细胞中，室温孵育10 min后，PBS清洗细胞3次。

8、激光共聚焦显微镜下观察。