NK细胞完全培养基使用说明:
以下的操作步骤是最初由Byum.设计的程序的众多改良版本中的一种。此程序的改良是通过运用除去血液中的纤维蛋白或抗凝血剂处理人体血液;这种改良对于其他物种来源血液或者其他组织非常有必要。
1. 轻轻颠倒瓶子使LSM充分混合
2. 无菌转移3 mlLSM到15 ml离心管中。
3. 混合2 ml除纤维蛋白血液或肝素处理血液和2 ml 生理盐水
4. 仔细的将稀释血液加入3 mlLSM(室温)于15ml离心管中,在血液和LSM中形成一个明显的分层。NK细胞完全培养基不要将稀释血液混合入LSM中。
5. 室温下400g离心15-30分钟,离心可以沉淀红细胞和多核白细胞同时可以再LSM上形成一层单核淋巴细胞,如上图所示。
6. 吸出淋巴细胞上方2-3mm的血浆。
7. 吸取淋巴细胞层以及它下面一半的LSM和转移到另外的一个离心管。加入等体积的平衡盐缓冲液至淋巴细胞离心管中,室温离心10分钟,离心速度设定在既不损伤细胞又能沉淀细胞即刻,例如160 - 260 x g(去除LSM和降低血小板的百分比)。
8. 用平衡盐缓冲液清洗细胞,用适当的培养基重悬细胞。
NK细胞完全培养基方法概述:
分离混合血液白细胞早期的方法,总是伴随红细胞聚集,只轻微影响白细胞。通过离心,红细胞密度增加聚集,同时可以从离心管上部收集白细胞。
Byum提出了一种更方便,通过使用Ficoll 甲泛影钠溶液离心快速分离方法。稀释的血液在Ficoll甲泛影钠溶液中分层,低速短时离心。红细胞和沉降到管底的粒细胞,和单个核细胞(淋巴细胞)和血小板可以从两个分层之间收集。
许多研究者不断努力,修订了Byum方法,MP生物医学公司生产的LSM,方法的独特之处是运用,泛影钠成功的代替了甲泛影钠。
NK细胞完全培养基相关产品如下:xyA079Hu 白介素6(IL6)检测试剂盒
xyA080Hu 白介素8(IL8)检测试剂盒
xyA081Hu 白介素9(IL9)检测试剂盒
xyA184Hu 层粘连蛋白β1(LAMβ1)检测试剂盒
xyA083Hu 瘦素受体(LEPR)检测试剂盒
xyA084Hu 瘦素(LEP)检测试剂盒
xyA085Hu 白血病抑制因子(LIF)检测试剂盒
AEA290Hu 抗SSA/Ro抗体(Anti-Ro)检测试剂盒
AEA291Hu 抗单链DNA抗体(Anti-ssDNA)检测试剂盒
xyA292Hu α-胞衬蛋白(SPTAN1)检测试剂盒
xyA463Hu 促甲状腺素(TSH)检测试剂盒
xyA921Ge 维生素D2(VD2)检测试剂盒
xyA920Ge 维生素D3(VD3)检测试剂盒
xyA785Hu 肾损伤分子1(Kim1)检测试剂盒
xyA632Hu 胃蛋白酶(PP)检测试剂盒
xyA633Hu 血小板衍生生长因子BB(PDGFBB)检测试剂盒
xyB100Hu 表面活性物质关联蛋白J(SPJ)检测试剂盒
xyB102Hu 肌球蛋白轻链2(MYL2)检测试剂盒
xyB104Hu 辅肌动蛋白α3(ACTN3)检测试剂盒
xyB105Hu 肌球蛋白轻链1(MYL1)检测试剂盒
xyB106Hu 肌球蛋白轻链激酶(MYLK)检测试剂盒
xyA086Hu L选择素(SELL)检测试剂盒
xyA087Hu 单核细胞趋化蛋白1(MCP1)检测试剂盒
xyA088Hu 单核细胞趋化蛋白2(MCP2)检测试剂盒
xyA089Hu 单核细胞趋化蛋白3(MCP3)检测试剂盒
xyA090Hu 巨噬细胞集落刺激因子(MCSF)检测试剂盒
xyA091Hu 巨噬细胞来源趋化因子(MDC)检测试剂盒
xyA102Hu 基质金属蛋白酶7(MMP7)检测试剂盒
xyA103Hu 基质金属蛋白酶8(MMP8)检测试剂盒
xyA105Hu 神经生长因子(NGF)检测试剂盒
xyA106Hu 神经营养因子3(NT3)检测试剂盒
xyA107Hu 神经营养因子4(NT4)检测试剂盒
xyA108Hu 骨保护素(OPG)检测试剂盒