产品简介：
单纯疱疹病毒(Herpes Simplex Virus，HSV)会引起单纯疱疹，是一种由 单纯疱疹病毒所致的病毒性皮肤病，中医称为热疮。能引起人类多种疾病，如 龈口炎、角膜结膜炎、脑炎以及生殖系统感染和新生儿的感染。在感染宿主后， 常在神经细胞中建立潜伏感染，激活后又会出现无症状的排毒，在人群中维持 传播链，周而复始的循环。单纯疱疹病毒在全球广泛分布，人群中感染极为普 遍，潜伏和复发感染者较多。患者和带毒者是该病的传染源。病毒可通过皮肤、 粘膜的直接接触或性接触途径进入机体，对人体健康造成严重损害，因此单纯疱疹病毒通用的快速准确鉴定对该病的预防和检疫有着重要作用，本公司开发了单纯疱疹病毒的 PCR 检测试剂盒，它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增单纯疱疹病毒，与其他病原没有交叉反应。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次，但只能用于科研。

规格及成分：

成 份	编号	十孔盒包装
PCR MagicMix 3.0	90805	1 mL（红盖）
超纯水	100935	1 mL（亮黄色）
单纯疱疹病毒通用PCR 引物混合液	13-64100yw	100 μL（白盖）
单纯疱疹病毒通用PCR 阳性对照（1×10E8 拷贝/μL）	60908-64100pc	50 μL（黄盖）
使用手册	13-64100sc	1份

运输及保存：
低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。
自备试剂：
样本DNA。
使用方法：
一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取 试剂盒兼容。可以选用本公司柱式病毒 DNAout，其使用手册可以从本公 司网站搜索产品名称或产品编号 70701-50 下载。 2. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和一 个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求 的样品起始量）中加 10μL 单纯疱疹病毒通用 PCR 阳性对照的 10 倍稀释 液而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放 冰上待用。
二、设置 PCR 反应（40μL 体系）
3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：

成分	样品管 N+2 个	PCR 阴性对照	PCR 阳性对照
PCR MagicMix 3.0	各 20 μL	20 μL	20 μL
单纯疱疹病毒通用PCR 引物混合液	各 2 μL	2 μL	2 μL
N+2 个样品 DNA 模板	各 18 μL	-	-
PCR 阴性对照（水）	-	18 μL	-
PCR 阳性对照（单纯疱疹病毒通用PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液）	-	-	18 μL

4. 按下表设置 PCR 反应：

过程	温度	时间
预变性	95℃	5min
PCR反应 （35 个循环）	95℃	30sec
	50℃	30sec
	72℃	30sec
最后延伸	72℃	7min

三、电泳检测
5. 取10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有预期条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实验无效。 对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑 制剂的感染。