人血管内皮细胞生长因子(VEGF-A)ELISA试剂盒的原理 ELISA 的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。人血管内皮细胞生长因子(VEGF-A)ELISA试剂盒在测定时，受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗 。

a.分子量大。合成肽采用化学方法制备，由于工艺的局限，合成数量有限，只能达到数百个氨基酸;而利用基因工程制备的抗原，分子量更大。
b.稳定性好。人血管内皮细胞生长因子(VEGF-A)ELISA试剂盒包被的抗原的稳定性可使 试剂 盒的效期得到保证，早期以合成肽为包被抗原的 试剂 盒效期只有3-4 个月，采用基因工程抗原后效期大大延长了。
c.基因工程抗原将特异性抗原决定簇基因融合表达，表达产物包含更多的抗原决定簇，可提高 试剂 盒的灵敏度，提高检出率。
d.纯化难度大。基因工程抗原的纯化技术难度较大。
合成多肽抗原是根据蛋白质抗原分子的某一抗原决定簇的氨基酸序列人工合成的多肽片段。合成肽抗原有以下特点： a.分子量太小;b.一般只含有一个抗原决定簇;c.纯度高;d.稳定性差。
人血管内皮细胞生长因子(VEGF-A)ELISA试剂盒棋盘试验的操作方法:
(1)将抗原按一定的梯度倍比稀释后，按照ELISA从上到下(或者从左到右)的顺序包被。
(2)将抗体按一定的梯度倍比稀释后按照ELISA从左到右或者从上到下加入。
(3)二抗的稀释倍数是一定的，然后显色，读值。
OD值的测定时，波长要根据显色剂的不同而定，一般上大家都使用TMB显色，450nm读值。根据读值得结果可以选定合适的抗原和抗体效价，人血管内皮细胞生长因子(VEGF-A)ELISA试剂盒这就是棋盘 实验的目的，如果抗原包被量已知而二抗的工作浓度不确定的话就用一抗和二抗作棋盘试验。
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