假结核耶尔森菌探针法荧光定量PCR试剂盒直销价格,详情介绍-960化工网

假结核耶尔森菌探针法荧光定量PCR试剂盒直销

价格：¥1300 - 3499

品牌：西格

产地：进口、国产

最新更新日期：2021-09-02 17:51

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上海西格生物科技有限公司

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产品属性

数量

英文名	Yersinia pseudotuberculosis

CAS号

详见说明书

保质期

详见说明书

供应商

上海西格

保存条件

详见说明书

规格

50T

产品说明

操作步骤 :
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

产品名称	假结核耶尔森菌探针法荧光定量PCR试剂盒直销
英文名称	Yersinia pseudotuberculosis
货号	XGR7372

PCR在分子克隆和DNA分析中有多种用途，下面就向大家介绍PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶（2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。
3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

循环步骤	温度	时间	循环数
预变性	94℃	5 min	1
变性	94℃	10 sec	30-40
退火	50-65℃	20 sec	30-40
延伸	72℃	30 sec/kb	30-40
终延伸	72℃	5 min	1

假结核耶尔森菌探针法荧光定量PCR试剂盒直销PCR实验步骤
典型的PCR由
（1）高温变性模板；
（2）引物与模板退火；
（3）引物沿模板延伸三步反应组成一个循环，通过多次循环反应，使目的DNA得以迅速扩增。其主要步骤是：
将待扩增的模板DNA置高温下（通常为93℃-94℃）使其变性解成单链；
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合，两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短；
耐热的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入，以目的基因为模板从5’→3’方向延伸，合成DNA的新互补链。
荧光定量PCR检测方法包括以下步骤：
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。
步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下是假结核耶尔森菌探针法荧光定量PCR试剂盒直销的相关产品：
耶尔森氏菌显色培养基
产品： BR
包装：250克
用途：生化研究。
保存：RT
2氧代，英文名或英文缩写：2Ketobutyric acid，级别：高，99%，规格：50毫克
二氧化碲;氧化碲(IV);酐TelluriuM dioxide;Tellurous anhydride;TelluriuM(IV) oxide
D2基3本基，英文名或英文缩写：Dpxenylalanine，级别：BR，99%，规格：5克
钙 Calcium formate,≥99.0% 100G 通用试剂
三烷 Trichlorosilane,≥99.0% 100252 25G 通用试剂
烟酰，英文名或英文缩写：VPP，级别：高，规格：5克
7录化铯CesiuM chloride
2'脱氧次核苷5'三嶙酸三钠盐，英文名或英文缩写：dITP，3Na，级别：BR，90%，规格：5克
二苯并砜 Dibenzothiophene sulfone,97% 10053 5G 通用试剂
D2基 D2Aminobutyric acid (99%) 262 1G 通用试剂
小鼠凝溶胶蛋白(GS)ELISA试剂盒，英文名： GS ELISA Kit
人血红素氧合酶1(HO-1)ELISA检测试剂盒Humanhemeoxygenase1,HO-1ELISAKit 96T/48T
大鼠游离原卟啉(FEP)免疫试剂盒 Rat Free erythrocyte proloporphyrin,FEP ELISA Kit
英文名称HumanCD40LELISAKit人CD40L规格：96T/48T
多糖/多酚植物组织蛋白制备预处理试剂盒20次
山羊淋巴细胞因子ELISAKit山羊淋巴细胞因子ELISAKit，48T/96T山羊淋巴细胞因子ELISAKit，48T/96T规格：48T/96T
假结核耶尔森菌探针法荧光定量PCR试剂盒直销兔子β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒组装/原装
Human hemoglobin C (HbC) ELISA Kit 人血红蛋白C(HbC)ELISA试剂盒
HumanInhibin,INHELISAKit 人抑制素(INH)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanfactorB,BFELISA试剂盒人B因子(BF)ELISA试剂盒规格：96T/48T
组织KB激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
HumanOncogeneProteinp190/bcr-ablELISAKitHumanOncogeneProteinp190/bcr-ablELISAKit人癌基因蛋白质p190/bcr-ablELISA试剂盒规格：96T/48T