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- 淡水鱼全血淋巴细胞分离液试剂盒说明书
¥800 - 2800
邦景
进口、国产
2021-09-03 14:13
我要认领上海邦景实业有限公司
陈小姐
3004972055@qq.com
产品属性
产品说明
公司优势：
1.淡水鱼全血淋巴细胞分离液试剂盒说明书具有多年的销售经验和资深的行业背景，我司秉承质量优先的理念，重视自主创新，希望广大科研工作者与我司达成长期的合作关系；
2.公司不仅与各大高校、科研机构以及研发性企业有着合作关系，还与国际接轨，我司代理多种知名的国际品牌，如ATCC、DSMZ、Millipore、Abcam,Serva、Pharmacia、eBioscience,Santa，Abnova，GenWay等。
产品名称：淡水鱼全血淋巴细胞分离液试剂盒说明书
有效期 2年储存条件 RT，避光，有效期2年单位盒本分离液为Ficoll、羟乙基淀粉550与泛影酸葡的混合液。抗凝外周血可在分离液中分层。离心时，在Ficoll、羟乙基淀粉的作用下红细胞与粒细胞聚集并迅速沉降；此时，淋巴细胞及其他单个核细胞仍处于分离液上层，红细胞污染可忽略不计。大部分血小板可在细胞清洗低速离心过程中去除。其他人及动物多种比重细胞分离液，因不同种属不同比重分离液的细胞离散系数及细胞带电不同，用户在制定分离液时应提供所需分离液的比重、动物种属及被分离细胞的名称。
操作步骤：
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer（10×）稀释成1×Binding buffer工作液备用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml无菌去离子水）。
2) 对于悬浮细胞，500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短，最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，加入细胞培养液，将细胞轻轻吹打下来，转移到离心管内，500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后，加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤，离心收集细胞，共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重悬细胞，使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液（细胞总数为1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，轻轻混匀，室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混匀后使用流式细胞仪检测（1小时内检测）。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组，正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析，绘制双色散点图（two-color dot plot），FITC为横坐标，PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时，活细胞仅有很低强度的背景荧光，早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光，晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测：
染色孵育后涂片，显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞，细胞核显示红色，膜上有绿色光环。
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改良V-P培养基250g用于蜡样芽孢杆菌的V-P试验R2A琼脂 R2A Agar 用于饮用水中细菌总数测定(USP、EP方法)抗生素检定培养基8号 Antibiotic Agar No.8 250 用于去甲万古霉素等的效价测定肠球菌肉汤250g/瓶用于肠球菌选择性菌incubationmedia肠球菌肉汤250g/瓶用于肠球菌选择性菌胰酪胨大豆多粘菌素肉汤 10ml/支*20 用于蜡样芽孢杆菌的MPN值测定
商业无菌检验培养基半固体动力培养基 Motility Test Medium(Semisolid) 用于动力观察，菌种保存，H抗原位相变异试验等(SN标准)GAM琼脂 Anaerobic Agar 250克用于梭菌和其他厌氧菌的分离培养EMJH培养基250g/瓶用于钩端螺旋体的增菌培养，每90ml培养基中添加260ubationmediaEMJH培养基250g/瓶用于钩端螺旋体的增菌培养，每90ml培养基中添加2601脑心浸液琼脂(BHIA) 250g 用于营养苛求细菌的增菌培养
11416 改良 McBride 琼脂基础(MMA) 250g/瓶用于李斯特氏菌的选择性分离，每升培养基中需添加 2.5g 及 200mg 环乙或 30mg 复达欣 incubation media 11416 改良 McBride 琼脂基础(MMA) 250g/瓶用于李斯特氏菌的选择性分离，每升培养基中需添加 2.5g 及 200mg 环乙或 30mg 复达欣21423 改良牛津培养基 10 支/盒每支用于 100ml11417 中 incubation media 21423 改良牛津培养基 10 支/盒每支用于 100ml11417 中10801 7.5%肉汤 250g/瓶用于金黄色葡萄球菌的均质增菌 incubation media 10801 7.5%肉汤 250g/瓶用于金黄色葡萄球菌的均质增菌10802 10%胰酪胨大豆肉汤 250g/瓶用于金黄色葡萄球菌的增菌和MPN 试验 incubation media 10802 10%胰酪胨大豆肉汤 250g/瓶用于金黄色葡萄球菌的增菌和MPN 试验
大鼠骨骼肌细胞完全培养基 100mL大鼠表皮角化细胞完全培养基 100mL大鼠真皮成纤维细胞完全培养基 100mL大鼠软骨细胞完全培养基 100mL
淡水鱼全血淋巴细胞分离液试剂盒说明书hDPSCs, 人前磨牙牙髓干细胞 Human叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-21小鼠星形胶质细胞(MA)(5×105)小鼠肺腺癌低转移细胞(绿色荧光蛋白标记);LA1-GFP 小鼠视网膜muller细胞完全培养基 100mL人牙龈成纤维细胞总RNAHGF NACPA1 Others Human 人 Carboxypeptidase-A1 / CPA1 人细胞裂解液 (阳性对照)注意事项：
1. 整个操作过程动作要尽量轻柔，勿用力吹打细胞，尽量在4℃下操作。
2. 反应完毕后请尽快检测，反应1 小时后荧光强度就开始衰变。
3. Annexin V-FITC 和 Propidium iodide 是光敏物质，在操作时请注意避光。
4. 试验操作过程中佩戴手套等防护用品。
5. 试验开始前将一定量的 10×Annexin V Binding Buffer 用超纯水（1:9）稀释至 1×备用。 
