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北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货人脂质运载蛋白-2(Lipocalin-2)检测试剂盒(ELISA方法)销*(代"售")，我公司供应的ELISA试剂盒品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京现货人脂质运载蛋白-2(Lipocalin-2)检测试剂盒(ELISA方法)销*(代"售")
编号：ZN2303
规格：96T
英文名：Human Lipocalin-2 ELISA Kit
品牌：百奥莱博
产地：北京
本试剂盒采用夹心法酶联免疫吸附法，用于体外定量分析人血清、血浆、唾液、尿液、细胞裂解液、细胞培养上清中Lipocalin-2的含量。预先包被的抗体为Lipocalin-2多克隆抗体。检测相抗体为Lipocalin-2多克隆抗体，经生物素标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后，PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应；经过PBS或TBS的彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的Lipocalin-2呈正相关。

Lipocalin-2也称NGAL，在细胞增殖、肿瘤发生和细胞凋亡过程中都有作用。本试剂盒所用的标准品是重组人的NGAL，从Q21-N198，有178个*基酸，分子量22KDa。

检测指标：Lipocalin-2；LCN2；NGAL
检测范围：156pg/ml～10000pg/ml
特异性：系统和其它因子无交叉反应
敏感性：＜10pg/ml

产品组成：

组分	规格	数量
预包被抗人Lipocalin-2抗体的96孔板	96T	1板
重组人Lipocalin-2标准品(冻干)	10ng/管	2管
生物素标记抗人Lipocalin-2(100X)	130μl	1管
亲和素-过氧化物酶复合物(ABC)(100X)	130μl	1管
样品稀释液	30ml	1瓶
抗体稀释液	12ml	1瓶
ABC稀释液	12ml	1瓶
TMB显色液	10ml	1瓶
TMB终止液	10ml	1瓶
洗涤缓冲液(25X)	20ml	1瓶
封板膜		4张

储存条件：2-8℃（频繁使用时），-20℃（长时间不用时）。
有效期：6个月(4℃)；12个月（-20℃）。

需自备的仪器和试剂：
1．标准规格酶标仪。
2．自动洗板机。
3．恒温箱
4．系列可调节移液器及吸头，一次检测样品较多时，最好用多通道移液器。
5．干净的试管和Eppendof管。
6．用去离子水将25X洗涤缓冲液稀释25倍，成1X洗涤缓冲液。

样品的准备和保存：
样品如果不立即分析，应分装后冷冻保存，且避免反复冻融。
细胞培养上清：离心去除沉淀，立即分析或分装后-20℃冷冻保存。
血清：用干净试管收集血液，室温凝固30分钟，1500×g离心15分钟，收集血清。立即分析或分装后-20℃冷冻保存。
血浆：采用肝素或EDTA抗凝，抽血后30分钟内在2-8℃温度下，1500×g离心15分钟。为消除血小板的影响，建议在2-8℃进一步10000×g离心10分钟。立即分析或分装后-20℃冷冻保存。
细胞裂解液：对于贴壁细胞，去除培养液，PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。加入适量裂解液，用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常10秒后，细胞就会被裂解。对于悬浮细胞，离心收集细胞，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。加入适量裂解液，用枪吹打把细胞吹散，用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后，10000～14000g离心3～5分钟，取上清。立即分析或分装后-20℃冷冻保存。

参考标准曲线数据：(取自某一批次质检数据，仅供参考，用户需要自己建立标准曲线)

浓度(pg/ml)	0	156	312	625	1250	2500	5000	10000
OD值	0.040	0.317	0.479	0.780	1.049	1.588	1.877	2.090

关于北京现货人脂质运载蛋白-2(Lipocalin-2)检测试剂盒(ELISA方法)销*(代"售")的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：
ZN2725 小鼠正五聚蛋白3(PTX3)检测试剂盒 Mouse Pentraxin 3 ELISA Kit
ZN2128 人趋化因子CXCL16检测试剂盒(ELISA方法) Human C-X-C motif chemokine 16 ELISA Kit
ZN2448 人硫氧还蛋白(Thioredoxin)检测试剂盒 Human Thioredoxin ELISA Kit
ZN2330 人基质金属蛋白酶9(MMP-9)检测试剂盒(ELISA方法) Human matrix metallopeptidase 9 ELISA Kit
ZN2650 小鼠白介素12(p70)检测试剂盒 Mouse Interleukin-12 ELISA Kit
ZN2053 人Caspase3(CASP3)ELISA试剂盒 Human Caspase-3 ELISA Kit
ZN2373 人颗粒蛋白前体(Progranulin)检测试剂盒 Human granulin epithelin precursor ELISA Kit
ZN2255 人白介素1受体拮抗剂(IL-1RA)检测试剂盒(ELISA方法) Human Interleukin-1 receptor antagonist protein ELISA Kit
ZN2575 小鼠补体因子H(CFH)检测试剂盒 Mouse Complement factor H ELISA Kit
ZN2895 大鼠趋化因子CCL4(MIP-1β)检测试剂盒 Rat Macrophage inflammatory protein 1 beta ELISA Kit
ZN2778 小鼠肿瘤坏死因子超家族成员14(LIGHT)检测试剂盒 Mouse Tumor necrosis factor ligand superfamily member 14 ELISA Kit
ZN2181 人FSTL3检测试剂盒(ELISA方法) Human Follistatin-like protein 3 ELISA Kit
ZN2501 小鼠血管紧张素Ⅰ转化酶(ACE)检测试剂盒 Mouse Angiotensin-converting enzyme ELISA Kit
ZN2821 大鼠趋化因子RANTES检测试剂盒 Rat regulated on activation normal T cell expressed and secreted ELISA Kit
ZN2703 小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)检测试剂盒 Mouse Macrophage inflammatory protein 2 ELISA Kit
ZN2106 人癌胚抗原相关细胞黏附分子1(CEACAM1)ELISA试剂盒 Human Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 1 ELISA Kit
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·Aspergillosis mRNA原位杂交试剂盒
编号：ZN0098
规格：100T
基本信息：
保存条件：4℃保存一年
工作量：100张切片。
有效期：一年。
适用种属：hμman
标记方式：3’—尾段标记
试剂盒中内容：
1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml；
2.预杂交液 2ml；
3.Aspergillosis mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液 2ml；
4.封闭液 5ml；
5.生物素化鼠抗地高*(代"辛") 5ml；
6.SABC-POD 5ml；
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
用户自备试剂：
原位杂交专用盖玻片；POLY-L-LYSINE；DEPC；20%甘油
缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC，0.5×SSC，0.2×SSC,原位杂交用 PBS)
一．培养细胞和冰冻切片
准备工作：
固定液：4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)；1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g，柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O，分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
操作程序：
注意：最重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗地高*(代"辛")：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲*透明，封片。
二．石蜡切片
如果有条件的话，应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后，及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6)，含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块，固定1小时即可，较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感，如动物大脑，固定时间30-40分钟，一般不要超过1小时。
1．常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。
3．石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间，例如5分钟,10分钟，20分钟，30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
结果观察：
Aspergillosis的细胞胞浆着色呈棕黄色。
注意事项：
由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数，加上基因仅由四个碱基排列组合而成，因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照，基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时，用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释，一般稀释2—10倍；并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况；如果出现大量的细胞核着色，往往和标本固定时间过长有关，应重新处理标本。


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ZN2233 人胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP-6)检测试剂盒(ELISA方法) Human Insulin-like growth factor-binding protein 6 ELISA Kit
ZN2553 小鼠CD25检测试剂盒(ELISA方法) Mouse Cluster of differentiation 25 ELISA Kit
ZN2873 大鼠细胞间粘附分子1(ICAM-1)检测试剂盒 Rat Intercellular adhesion molecule 1 ELISA Kit
ZN2276 人白介素1受体1(IL-1R1)检测试剂盒(ELISA方法) Human Interleukin-1 receptor type 1 ELISA Kit
ZN2158 人上皮细胞粘附分子(EpCAM)检测试剂盒(ELISA方法) Human Epithelial cell adhesion molecule ELISA Kit
ZN2479 人TNF相关凋亡诱导配体(TRAIL)检测试剂盒 Human TNF-related apoptosis-inducing ligand ELISA Kit
ZN2799 小鼠转化生长因子β2 (TGF-β2)检测试剂盒 Mouse Transforming growth factor beta 2 ELISA Kit
ZN2202 人细胞介素6(IL6)受体β亚基(IL-6Rβ)检测试剂盒(ELISA方法) Human Interleukin-6 receptor subunit beta ELISA Kit
ZN2084 人CD21(CR2)ELISA试剂盒 Human Complement receptor type 2(CD21) ELISA Kit
ZN2404 人成纤维细胞活化蛋白α(Seprase)检测试剂盒 Human Fibroblast Activation Protein Alpha ELISA Kit
ZN2724 小鼠催乳素(Prolactin)检测试剂盒 Mouse Prolactin ELISA Kit
ZN2606 小鼠内皮细胞特异性分子1(Endo*(代"c")an)检测试剂盒 Mouse Endothelial cell-specific molecule 1 ELISA Kit
ZN2009 人ADAM9(MDC9)ELISA试剂盒 Human A Disintegrin and Metalloprotease 9 ELISA Kit
ZN2329 人基质金属蛋白酶8(MMP-8)检测试剂盒(ELISA方法) Human matrix metallopeptidase 8 ELISA Kit
ZN2649 小鼠白介素12(p40)检测试剂盒 Mouse Interleukin-12 subunit beta ELISA Kit
ZN2531 小鼠趋化因子CCL1检测试剂盒(ELISA方法) Mouse Chemokine(C-C motif) ligand 1 ELISA Kit

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