YJ010 Anti-GFP免疫磁珠

¥1838
雅酶
2021-09-06 22:18

上海雅酶生物科技有限公司

我要认领
上海雅酶生物科技有限公司
于洋
17321035826 021-34781650
info@epizyme.cn
产品属性
规格1mL
产品说明
Anti-GFP免疫磁珠
Anti-GFP Magnetic Beads
本产品4运输;保存于4,禁止产品冻结长期存放请保证试剂管竖立向上,保质期24个月。

货号规格
goodYJ0101 mL

产品简介
goodAnti-GFP免疫磁珠采用先进的纳米表面生物技术,将高质量的鼠源单克隆Anti-GFP抗体高密度共价偶联在超顺磁性纳米微球表面,是纯化GFP标签蛋白的理想工具。与市场上同类产品相比,本产品具有更大的特异性表面区域及更多的表面抗体结合位点,磁珠使用量更少,非特异性结合率低,10 min内即可完成抗体吸附过程,30 min内完成抗原沉淀操作,使用起来简便高效。可有效避免长时间操作造成目标蛋白被水解,确保了目标蛋白的活性及蛋白复合物的完整性。
good本产品可应用于多种样品中抗原的免疫沉淀反应和少量蛋白质的纯化,细胞裂解液、细胞分泌液上清、血清、动物腹水以及其它免疫抗原等均可适用。


产品参数

项目参数
抗体亚型鼠源IgG
适用范围免疫沉淀(IP),GFP标签蛋白纯化
推荐使用体积IP:每500μL细胞裂解液使用25 μL磁珠
融合蛋白结合量每毫升磁珠可结合的GFP标签蛋白大于0.6mg

操作步骤
good
◆ 磁珠预处理
goodgg1. 用移液器轻柔吹打Anti-GFP免疫磁珠,使其充分混悬25~50µL磁珠悬液置于1.5mL离心管中;
goodgg2. 加入500µL1×TBS缓冲液(货号PS121),用移液器轻柔吹打重悬Anti-GFP免疫磁珠,接着在磁力架上静置1 min后, 吸弃上清;
goodgg3. 重复步骤2两次;注意:面对多个样品时,可先将一共所需的磁珠预处理后再分装到各个反应管中。

good
◆ 样品的结合
goodgg4. 在预处理后的磁珠中加入500μL细胞裂解液,置于翻转混合仪孵育(常温2h,4过夜);
goodgg5. 将上述混合液置于磁力架上静置1 min,然后把上清液转移到新的离心管中备用(上清液可用于检测GFP标签蛋白是否存在残留)原离心管中剩余的即为 蛋白-磁珠复合物注意:结合过程中,磁珠可能会出现聚团或呈片状,属于正常现象,不会影响实验结果。

good
◆ 洗涤
goodgg6. 步骤5所得的 蛋白-磁珠复合物中加入500µL1×TBST缓冲液(货号PS103),用移液器轻柔吹打重悬,接着在磁力架上静置1 min后, 吸弃上清;
goodgg7. 重复步骤6大约次,直至洗涤后的上清液OD280小于0.05为止;注意:如上清液的OD280仍大于0.05,则适当增加洗涤次数。

good
◆ 蛋白洗脱
goodgg8. 根据下游用途选择洗脱方法。如需直接检测目的蛋白,则在上述洗涤过的 蛋白-磁珠复合物中加入50μL 1×蛋白上样缓冲液(货号:LT101),煮沸5min,冷却至室温并在磁力架上静置1 min后取上清进行SDS-PAGE检测。

常见问题及对策

常见问题原因解决方法
高背景条带蛋白非特异结合到抗体,磁珠或离心管上对裂解液进行预处理去除非特异蛋白
在最后一次洗涤前, 转移整个样品到新的离心管中然后进行离心
洗涤次数不够增加洗涤的时间和次数
无蛋白条带GFP标签蛋白没有表达确保目的蛋白带有GFP标签
制备新鲜的裂解液
使用恰当的蛋白酶抑制剂
孵育时间不足延长孵育时间
样品中存在干扰物质减少DTT,β-me等还原剂以及SDS的用量,甚至不使用

注意事项
good1. 
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;
good2. 本产品仅限科研使用。