产品组成

货号	-20	-100
规格	20 ml	100 ml

产品说明
无血清细胞冻存液，通用于各种动物细胞株。特别配方具有有效提高细胞冻存活率和复苏活力。不含动物来源性蛋白，能减少各类病毒、霉菌和支原体等的污染，确保冻存细胞安全。既适用于一般培养细胞的冻存，也适用于无血清培养细胞和蛋白表达细胞的冻存。
产品特色

1. 高安全性，完全使用医药品等级原料进行生产，不含动物成分，病毒、霉菌和支原体等污染可能性低，各批产品之间有更高的产品质量一致性。
2. 细胞存活率高，无批次差异。
3. 完全冻存液配方，可直接使用，方便简捷，可直接存放于-80℃冰箱冻存，无需经过费时的程序降温过程（省时、省力、省钱）。

保存条件
储存于4℃以下。质量保障期从产品的生产日期起，为期3年。3个月以上没有使用冻存液计划时，尽可能冷冻保存。为避免重复冻融过程可能导致的冻存液品质下降和性能降低，推荐将100 ml产品分装小瓶后，再存放于4℃以下或-20℃冰箱冻存。
使用无血清冻存液进行细胞冷冻保存和复苏方法
细胞冷冻保存方法
选择冻存处于对数生长期的细胞有助于提高复苏细胞存活率。

1. 按照常用方法收集悬浮细胞或贴壁细胞于试管中。
2. 按照培养细胞密度和所用细胞冻存管的尺寸计算所需冻存细胞数。

（参考：5×105至5×106 cells/ml）。

1. 取相当于所需细胞数的细胞悬浮液量，置于离心管中，离心收集培养细胞（参考离心条件：1,000~2,000 rpm，4℃，3~5 min）。移去离心管中的上清液。

1. 加入适量的无血清型细胞冻存液于离心管中，使细胞浓度为5×105至5×106 cells/ml。缓慢地混合均匀，制成细胞混合液。
2. 将离心管中的细胞混合液分装于已标示完全的冷冻保存管中。
3. 直接将含细胞混合液的冻存管放入-80℃冰箱，长期冷冻保存。
4. 若研究者需要液氮保存时，可将完全冻结的冻存管（放入-80℃冰箱后至少一昼夜）移至-196℃液氮罐。

冻存细胞复苏方法
1. 从冰箱里取出细胞冷冻保存管，立即放入37℃振动水浴槽中快速解冻。

1. 待冻存管中细胞混合液完全融化后，立即加入1 ml细胞培养基于该冷冻管中与细胞混合，再将细胞混合液从冻存管中移入含有9 ml该细胞培养基的试管中，混合均匀。
2. 离心收集培养细胞（参考离心条件：1,000~2,000 rpm，4℃，3~5 min），移去上清液。
3. 清洗细胞，充分洗净残留冻存液。
4. 加入适量的新鲜细胞培养基，使用移液管缓缓地均匀细胞混合液。适量地稀释后，将细胞混合液移至事先准备好的培养瓶中。
5. 镜检后，研究者可根据各自方法和需要来进行细胞培养。

复苏细胞测试
复苏细胞存活率

细胞株	冻存时间（天数）	细胞存活率（%） （冻存温度-80℃）
293E	7	97.6
FO	7	81.8
CHO-S	7	88.1

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注意事项

1. 为保证得到理想的实验结果，在使用此试剂盒之前请认真阅读该注意事项；
2. 试剂（尤其是小瓶装的试剂）在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落；
3. Propidium iodide（PI）能通过皮肤吸收，对眼睛有刺激作用；
4. 此试剂盒仅供科研使用，不宜用于临床诊断；
5. 细胞的洗涤同常规方法。