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- 鸭肝炎病毒1型(DHV-1)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
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维伯鑫
2021-09-08 00:37
我要认领广州维伯鑫生物科技有限公司
严老师
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产品说明
【产品名称】
通用名称：鸭肝炎病毒1型(DHV-1)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
Name ：Detection Kit for Duck Hepatitis Virus type I (Real-Time PCR Method)
【包装规格】25T/盒、50T/盒
【预期用途】
本试剂盒适用于检测肝组织、全血等标本中的鸭肝炎病毒1型RNA，适用于鸭肝炎病毒1型感染的辅助诊断及流行病学调查，其检测结果仅供参考。
【检验原理】
本试剂盒用一对鸭肝炎病毒1型特异性引物，结合一条特异性荧光探针，用一步法荧光RT-PCR技术对鸭肝炎病毒1型RNA进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
【试剂组成】| 包装规格 | 25T/盒 | 50T/盒 |
| DHV-1反应液 | 500μL×1管 | 500μL×2管 |
| 酶液 | 25μL×1管 | 50μL×1管 |
| DHV-1阳性质控品 | 50μL ×1管 | 50μL ×1管 |
| 阴性质控品 | 250μL ×1管 | 250μL ×1管 |
注：
1）不同批号试剂不能混用。
2）试剂盒内各试剂组份足够包装规格所标示的检测次数。
【储存条件及有效期】-20℃±5℃，避光保存、运输、反复冻融次数不超过5次，有效期12个月。
【适用仪器】ABI 、安捷伦MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf等系列荧光定量PCR检测仪。
【标本采集】病死或扑杀禽，取肝组织；待检活禽，用注射器取血5mL至EDTA-2Na抗凝管。
【保存和运输】
上述标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-70℃，但不能超过6个月，标本运送应采用2~8℃冰袋运输，严禁反复冻融。
【使用方法】- 样品处理（样本处理区）
- 样本前处理
每份组织分别从3个不同的位置称取样品约1g，手术剪剪碎混匀后取0.05g于研磨器中研磨，加入1.5mL生理盐水后继续研磨，待匀浆后转至1.5mL灭菌离心管中，8000rpm离心2min，取上清液100uL于1.5mL灭菌离心管中。
1.2核酸提取
推荐采用广州维伯鑫生物科技股份有限公司生产的核酸提取或纯化试剂（磁珠法或离心柱法）进行核酸提取，请按照试剂说明书进行操作。- 试剂配制（试剂准备区）
根据待检测样本总数，设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照；反应管数每满10份，多配制1份)，每测试反应体系配制如下表：| 试剂 | DHV-1反应液 | 酶液 |
| 用量（样本数为N） | 20μL | 1μL |
将混合好的测试反应液分装到PCR反应管中，21uL/管。- 加样（样本处理区）
将步骤1提取的核酸、阳性质控品、阴性质控品各取4μL，分别加入相应的反应管中，盖好管盖，混匀，短暂离心。- PCR扩增（核酸扩增区）
- 将待检测反应管置于荧光定量PCR仪反应槽内；
- 设置好通道、样品信息，反应体系设置为25μL；
荧光通道选择：检测通道（Reporter Dye）FAM， 淬灭通道（Quencher Dye）NONE，ABI系列仪器请勿选择ROX参比荧光，选择None即可。- 推荐循环参数设置：
| 步骤 | 循环数 | 温度 | 时间 | 收集荧光信号 |
| 1 | 1 cycle | 42℃ | 20min | 否 |
| 2 | 1 cycle | 95℃ | 10min | 否 |
| 3 | 40 cycles | 94℃ | 15sec | 否 |
| 55℃ | 30sec | 是 |
【注意事项】
1.所有操作严格按照说明书进行；
2.试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完全混匀并短暂离心；
3.反应液应避光保存；
4.反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；
5.使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；
6.样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；
7.实验完毕后用10%次氯酸或75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；
8.试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
【生产企业】
企业名称：广州维伯鑫生物科技股份有限公司邮编：510663
生产地址：广州高新技术产业开发区科学城科丰路31号G11栋201号
电子邮箱：info@vipotion.com电话：020-66377266
公司网址：http://www.vipotion.com传真：020-66377267 平台客服
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