非酶DNA清除剂

¥1
xuanya
中国/美国
2021-09-08 10:21

上海烜雅生物科技有限公司

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上海烜雅生物科技有限公司
黄经理
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产品属性
保存条件常温运输和保存
保质期两年
英文名DNA Erasol
数量860
供应商上海烜雅生物科技有限公司
规格100mL
产品说明
非酶DNA清除剂产品及特点:
用Trizol等方法提取的总RNA样品中经常会含有基因组DNA污染,这些污染会影响下游的RT-PCR和Northern杂交等实验 。目前最常用的RNase-free DNase处理方法因DNase中所含残留的RNase能破坏RNA完整性而具有很大缺陷。xuanya开发的非酶法DNA清除剂不但彻底避免了RNase-free DNase的这一缺陷,同时还具有操作快速,稳定性好和性价比高等诸多优点,完全可以替代价格昂贵的RNase-free DNase。
1.高效,能使总RNA中的基因组DNA污染降上百倍(根据PCR检测)而RNA 分子完整性不会受到任何影响。
2.不含RNase污染,因为本产品为非酶产品, 所用溶液又经过xuanya的液相RNase清除剂的处理( 能不可逆地灭活RNase) ;而在制备RNase-free DNase时,为避免DNase失活,处理条件往往比较温和,所以终产品中往往残留有RNase污染。
3.快速,全部操作在样品管中完成,只需要十多分钟,不需要37℃保温和酚/氯仿抽提;而使用RNase-free DNase时,需要上述处理,增加了污染RNase的可能性。
4.稳定,本产品为非酶产品,可以常温运输和4℃长期保存;而RNase-free DNase的运输和长期保存必须在低温进行。
5.性价比高,单位成本远低于RNase-free DNase。
6. 只能回收长度在200nt以上的RNA(DNA Erasol-2可以回收长度在200nt以上和以下的RNA)。

非酶DNA清除剂运输及保存:
常温运输、4℃保存,有效期一年。
自备试剂:70%乙醇

非酶DNA清除剂使用方法
1. 将总RNA溶液与DNA Erasol按 3:1 的比例混合(即300uL RNA溶液需加100uL DNA Erasol)。
2. 12000-15000 g 室温离心 10 分钟后小心弃上清,
3. 在沉淀中加入 1 mL 自备 70%乙醇,震荡半分钟。
4. 12000-15000 g 室温离心 5 分钟后小心弃上清。
5. 将离心管短暂快速离心,小心吸弃余液。
6. 加入适量 RNase-free 水或液相 RNase 清除剂溶解 RNA 沉淀,立即使 用或放-80℃长期保存。

非酶DNA清除剂注意:本产品只能回收长度在200nt以上的RNA,RNA样品中含有小RNA,将会丢失。对如果要去除小RNA 样品中的DNA污染,建议使用xuanya的DNA Erasol-2

非酶DNA清除剂相关资料
RNase-free DNase 制备方法
去除DNase中RNase的方法有agarose-coupled amino phenylphosphoryl-uridine-2' (3')-phosphate 亲和吸附法(NAR,4:241, 1977) ,DEAE-cellulose 吸附法(Anal. Biochem.14:269 , 1966), Macaloid 吸附法 (Molecular Cloning p452, 1982)和 Iodoacetate 灭活 法 (JBC 244:924,1969)。从原理上将讲,用吸附法彻底去除RNase几乎是不能的,就如想在温和条件下让一个化学平衡反应只向一个方向进行一样。另外,当时检测 RNA 完整性的方法是靠最原始的密度梯度离心法,十分粗糟。 即便用这样的方法,数篇文章都提到残留的 RNase 十分难以去除。最新的研究表明,在E.coli细胞中就存在20余种RNase,而作为原材料的牛胰DNase所含RNase种类肯定也不在少数,用特异性本来就很差的吸附法同时去除DNase粗产品中的各种RNase几乎是不可能的。xuanya初步的实验结果也显示,使用上述方法非常难以得到真正的RNase-free DNase。所以使用RNase-free DNase时一定要严格按厂家提供的操作手册执行,过长时间的保温和用量都有可能降解您珍贵的RNA。

非酶DNA清除剂疑难解答
Q: 能否将本产品用于去除蛋白质溶液中的 DNA?
A: 不能,只能用于去除 RNA 溶液中的 DNA 污染。

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