链球菌A组PCR试剂盒

¥2490
康朗生物
中国/上海
2021-09-09 04:45

上海康朗生物科技有限公司

我要认领
上海康朗生物科技有限公司
蔡盼
18217752821 021-61998208
shklbio@163.com
产品属性
数量大量
英文名Group A Streptococcus spp.(GAS)
保质期一年
供应商上海康朗生物科技有限公司
保存条件负20度
规格50次
产品说明

链球菌A组PCR试剂盒

Group A Streptococcus spp.(GAS)

产品及特点

A 组链球菌(GAS)又称化脓性链球菌,是人类细菌感染中最重要的病原 之一。GAS 可侵及人体的任何部位,但以上呼吸道感染常见,其次是皮肤软 组织感染。GAS 可引起化脓性疾病及非化脓性并发症两类疾病。GAS 也是变 反应性疾病风湿热和急性肾小球肾炎的间接原因。近年来由 GAS 所引起的严 重感染,侵袭性 A 组链球菌感染发病率的增长及其所致严重后果,也引起了人 们对该类细菌感染更大的关注。本产品是根据 PCR 原理开发检测链球菌 A 组 的试剂盒,它具有下列特点: 

1. 即开即用,用户只需要提供 DNA 模板。

2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增链球菌 A 组,与其他病原没有 交叉反应。

3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。

4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。

5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。

链球菌A组PCR试剂盒规格及成分

编号

成分

规格

试剂一

PCR MagicMix 3.

1 mL(红盖)

试剂二

超纯水

1 mL(亮黄盖)

试剂三

链球菌 A 组 PCR 引物混合 液

100 μL(白盖)

试剂四

链球菌 A 组 PCR 阳性对照 (1×10E8 拷贝/μL)

50 μL(黄盖))

试剂五

使用手册

1 份

运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其 他试剂。

自备试剂 样品 DNA。


使用方法 一、样品 DNA 的制备

1. 如果有 N 个样品,必须设置 N+2 个提取,多出的一个是 PC(样品制备阳 性对照),一个是 NC(样品制备阴性对照)。可以用 10μL 阳性对照的 1 千倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此 作为 PC。另外用水作为 NC。

2. 用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数寄生虫 DNA 提取 试剂盒兼容。

二、设置 PCR 反应(40μL 体系)

3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性 对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分:

成分

N+2

样品

PCR阴性对照

PCR阳性对照

PCR Magic Mix 3.0

各20 μL

20 μL

20 μL

链球菌 A 组PCR引物混合液

各2 μL

2 μL

2 μL

N+2 个样品 DNA 模板各 18 μL

PCR 阴性对照(水)

18 μL

-

PCR 阳性对照(链球菌 A 组 PCR 阳性对照的 10000 倍稀释液)

-

18 μL

4. 按下表设置 PCR 反应:

过程

温度

时间

预变性

95℃

5 min

PCR反应

(35个循环)

95℃

15 sec

57℃

15 sec

72℃

40 sec

最后延伸

72℃

10 min

三、电泳检测

5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。

本试剂盒适用于各种 RNA制品的反转录反应以及随后的PCR扩增。它采用AMV进行反转录反应,能够获得更长的反转录产物。同时,在20ul反转录体系和50ul PCR反应体系中,还可以一次性得到足够量的PCR产物用于后续的克隆实验。本试剂盒中配置的酶均为进口的酶。RT酶采用进口的AMV,所以cDNA更长,基因的信息保留得更完整!反转录过程中特异的RNase抑制剂可有效降低由于外源RNase污染而导致实验失败的风险。本试剂盒使用方便、快捷,可广泛用于cDNA克隆及目的基因检测等分子生物学实验。
注意:
1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!