口蹄疫病毒A血清型核酸检测试剂盒(荧光PCR法)

¥3899
研生
进口、国产
2021-09-09 09:28

上海研生实业有限公司

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上海研生实业有限公司
王经理
15201736385 021-59963601
shyssw@126.com
产品属性
保存条件详见说明书
保质期详见说明书
英文名详见说明书
数量100
供应商上海研生
CAS号详见说明书
规格50T
产品说明
口蹄疫病毒A血清型核酸检测试剂盒(荧光PCR法)客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM) 
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
产品特点:
灵敏度高:可检测个位拷贝数的基因
特异性高:有效避免非特异性扩增的出现
稳定性高:复孔间差异小,实验结果重复性强
扩增性能优:扩增效率高,荧光信号强

vACE I (Human Angiotensin I Converting Enzyme) ELISA Kit 人血管紧张素Ⅰ转化酶 96T
AP(Human Aprotinin) ELISA Kit 人抑肽酶 96T
Casp-12(Human Caspase 12) ELISA Kit 人胱天蛋白酶12 96T
PKA(Human Protein kinase A) ELISA Kit 人蛋白激酶A 96T
ADAM10(Human A Disintegrin And Metalloprotease 10) ELISA Kit 人解整合素样金属蛋白酶10 96T
MMP11(Human matrix metalloproteinase 11) ELISA Kit 人基质金属蛋白酶11 96T
TS(Human thymidylate synthetase) ELISA Kit 人胸苷酸合成酶 96T
TPHuman thymidinephosphorylase) ELISA Kit 人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶 96T
PARP(Human Poly ADP ribose polymerase) ELISA Kit 人多聚ADP核糖聚合酶 96T
GCK(Human glucokinase) ELISA Kit 人葡萄糖激酶 96T
MAO(Human monoamine oxidase) ELISA Kit 人单胺氧化酶 96T
cPLA2(Human cytosolic phospholipase A2) ELISA Kit 人胞浆型磷脂酶A2 96T
DAO(Human diamine oxidase) ELISA Kit 人二胺氧化酶 96T
COX-2(Human cyclooxygenase-2) ELISA Kit 人环加氧酶2 96T
CDK5(Human Cyclin Dependent Kinase 5) ELISA Kit 人周期素依赖性激酶5 96T
KLK 10(Human Kallikrein 10) ELISA Kit 人激肽释放酶10 96T
PLC Gamma1(Human Phospholipase C Gamma1) ELISA Kit 人磷酯酶Cγ链 96T
NA(Human neuraminidase) ELISA Kit 人神经氨酸酶 96T
PIPLC(Human phosphoinositide-specific phospholipase C) ELISA Kit 人磷酯酰肌醇特异性磷酯酶C 96T
口蹄疫病毒A血清型核酸检测试剂盒(荧光PCR法)PLC(Human Phospholipase C) ELISA Kit 人磷酯酶C 96T
Tyk-2(Human tyrosine kinase2) ELISA Kit 人酪氨酸激酶2 96T
ICE(Human Interleukin 1 Beta converting enzyme) ELISA Kit 人白介素1β转换酶 96T
ILK-1(Human integrin-linked kinase 1) ELISA Kit 人整合素连接激酶1 96T
CYP21B(Human Cytochrome P450c21/21-hydroxylase) ELISA Kit 人细胞色素P450c21B/21-羟化酶 96T
TdT(Human terminal deoxynucleotidyl transferase) ELISA Kit 人末端脱氧核苷酸转移酶 96T
IDO(Human indoleamine 2,3-dioxygenase) ELISA Kit 人吲哚胺2,3-双加氧酶 96T
PRSS(Human serine protease) ELISA Kit 人丝氨酸蛋白酶 96T
Syk(Human spleen tyrosine kinase) ELISA Kit 人脾脏酪氨酸激酶 96T
STK(Human serine/threonine protein kinase) ELISA Kit 人丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶 96T
IRAK(Human interleukin receptor associated kinase) ELISA Kit 人白介素受体相关激酶 96T
UK(Human urokinase) ELISA Kit 人尿激酶 96T
PCK(Human phosphoenolpyruvate carboxykinase) ELISA Kit 人磷酸烯醇式酸羧激酶 96T
Human trypsin ELISA Kit 人胰蛋白酶 96T
BACE1(Human Beta-site APP-Cleaving Enzyme 1) ELISA kit 人β位淀粉样前体蛋白裂解酶1 96T
PDI(Human Protein disulfide-isomerase precursor) ELISA Kit 人蛋白二硫化物异构酶前体 96T
PDIA3(Human protein disulfide-isomerase A3) ELISA Kit 人蛋白二硫化物异构酶A3 96T
SDH(Human sorbitol dehydrogenase) ELISA Kit 人山梨醇脱氢酶 96T
PPI(Human Peptidyl prolyl cis/trans isomerase) ELISA Kit 人肽基脯氨酰顺反异构酶 96T

实时荧光定量PCR:
实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在电脑软件之中,通过对每个样品Ct值的计算,根据标准曲线获得定量结果。因此,实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的: 1)Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时,刚刚进入真正的指数扩增期(对数期),此时微小误差尚未放大,因此Ct值的重现性极好,即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增,得到的Ct值是恒定的。 2)Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系,可利用标准曲线对未知样品进行定量测定,因此,实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。 外标准曲线的定量方法相比内标法是一种准确的、值得信赖的科学方法。利用外标准曲线的实时荧光定量PCR是迄今为止定量最准确,重现性定量方法,已得到全世界的公认,广泛用于基因表达研究、转基因研究,药物疗效考核、病原体检测等诸多领域。
定量PCR方法:
a、竞争法
选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中,待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增(其中一个引物为荧光标记)。扩增后用内切酶消化PCR产物,竞争性模板的产物被酶解为两个片段,而待测模板不被酶切,可通过电泳或高效液相将两种产物分开,分别测定荧光强度,根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。 b、内参照法
在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物,内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记,下游引物不标记。在模板扩增的同时,内标也被扩增。在PCR产物中,由于内标与靶模板的长度不同,二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来,分别测定其荧光强度,以内标为对照定量待检测模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或生物素等标记引物,扩增产物被固相板上特异的探针所结合,再加入抗di高辛或生物素酶标抗体-辣根过氧化物酶结合物,最终酶使底物显色。常规的PCR-ELISA法只是定性实验,若加入内标,作出标准曲线,也可实现定量检测目的。