土壤酸性转化酶(S-AI)测试盒

¥980
Xkbio
国产
2021-09-09 16:31

上海晅科生物科技有限公司

我要认领
上海晅科生物科技有限公司
朱经理
13671826025 021-62457717
2115560989@qq.com
产品属性
数量100
英文名Soil acid invertase (S-AI) test kit
CAS号
保质期1年
供应商上海晅科生物科技有限公司
保存条件2-8℃
规格100管/48样
产品说明


土壤酸性转化酶(
Solid-Acid invertase, S-AI)试剂盒说明书

微量法 100 /48

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义:

S-AI pH 4.5~5.0(酸性)条件下催化蔗糖不可逆地分解为果糖和葡萄糖,是土壤微生物蔗糖代谢关键酶之一。

测定原理:

S-AI 催化蔗糖降解产生还原糖,进一步与 3,5-二硝基水杨酸反应,生成棕红色氨基化合物,在 510nm 有特征光吸收,在一定范围内 510nm 光吸收增加速率与 AI 活性成正比。自备用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、移液器、微量石英比色皿/96 孔板和蒸馏水。

试剂组成和配制:

试剂一:液体 50mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入 25mL 试剂一充分溶解备用;用不完的试剂 4℃ 保存;
试剂三:液体 10mL×1 瓶,4℃保存;

样品处理:

新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干,过 30~50 目筛。

测定步骤和加样表:

试剂名称(μL测定管对照管
风干土样(g0.050.05
试剂一400
试剂二400
混匀, 37准确水浴30min 后,95℃水浴 10min盖紧,以防水分散失,流水冷却后充分混匀以保证浓度不变10000g 25℃离心 10min,取上清液
上清液200200
试剂三100100
混匀,95℃水浴 10min盖紧,以防止水分散失,流水冷却后充分混匀, 510nm 处,记录各管吸光值 A,如果吸光值大于 2,可以用蒸馏水稀释后测定(计算公式中乘以相应稀释倍)ΔA=A 测定-A 对照。

相关图片:


S-AI 活性计算:
  1. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为y = 0.0016x -0.001x 为标准品浓度μg/mLy 为吸光值。单位的定义:每天每 g 土样中产生 1mg 还原糖定义为一个 S-AI 活力单位。
S-AI 活力(mg/d /g 土样)=[(ΔA +0.001) ÷0.0016×V 反总÷W÷T ÷1000=240×(ΔA+0.001)
V 反总:反应体系总体积:0.4mLT:反应时间,1/48dW:样本质量,0.05g1mg=1000μg
  1. 96 孔板测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为y = 0.0008x -0.001x 为标准品浓度μg/mLy 为吸光值。单位的定义:每天每 g 土样中产生 1mg 还原糖定义为一个 S-AI 活力单位。
S-AI 活力(mg/d/g 土样)=[(ΔA +0.001) ÷0.0008×V 反总÷W÷T ÷1000=480×(ΔA+0.001)
V 反总:反应体系总体积:0.4mLT:反应时间,1/48dW:样本质量,0.05g1mg=1000μg