产品类别：红细胞的分离
产品编号：RBCH2012RK
产品名称：兔红细胞分离液试剂盒
产品规格：200ml/KIT
产品价格：￥500.00元
本品用于分离兔红细胞
“XXXX”动物外周血红细胞分离液实验方法技术文档编号：TBD0047SOP
【产品规格】200ml/Kit
【产品组成】为方便广大用户使用，试剂内容如下：
| 名称 | 产品编号 | 规格 |
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| A | XXXX 动物外周血红细胞分离液 | | 200ml |
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| B | 样本稀释液（赠品） | 2010C1119 | 200ml |
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| C | 清洗液（赠品） | 2010X1118 | 200ml |
| D | 说明书 | | 1 份 |
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【实验前准备】适用仪器:最大离心力可达 1200g 的水平转子离心机
【检验方法】全过程样本、试剂及实验环境均需在 20±2℃的条件下进行。
首先取抗凝血按体积比 1:1 的比例加样本稀释液（产品编号：2010C1119）混匀，根据
稀释后的样本量大小，分以下两种情况：
情况 A：稀释后的血液样本量小于 5ml 时，实验方法如下：- 取一支 15ml 离心管，先加入与稀释后样本等量的分离液（注：分离液最少不得少于 3ml）。
- 用吸管小心吸取稀释后的血液样本加于分离液液面上，600-900g，离心 25-30min（注：根据血液样本量确定离心条件，血液样本量越多，离心力越大，离心时间越长，具体离心条件需客户自行摸索，以达到最佳分离效果）。
- 离心后，此时离心管中由上至下分为四层。第一层为血浆层。第二层为环状乳白色淋巴细胞层。第三层为透明分离液层。第四层为红细胞层。
- 用吸管小心吸取第一、二、三层，弃去，在剩余红细胞层中加入 10ml 清洗液（产品编号：2010X1118），混匀细胞。
- 250g，离心 10min。
- 用吸管以 5ml 清洗液（产品编号：2010X1118）重悬所得细胞。
- 重复 6、7、8，弃上清后以 0.5ml 后续实验所需相应液体重悬细胞。
情况 B：稀释后的血液样本量大于等于 5ml 时，实验方法如下：- 取一支适当的离心管，先加入与稀释后样本等量的分离液。
- 将经稀释后的血液样本小心加于分离液之液面上，650-950g（最大离心力可至 1000g），离心 25-30min。（注：根据血液样本量确定离心条件，血液量越多，离心力越大，离心时间越长，具体离心条件需客户自行摸索，以达到最佳分离效果。加入血液样本后，样本及分离液总体积不得超过离心管总体积的三分之二）。
【注意事项】- 全过程样本、试剂及实验环境均需在 20±2℃的条件下进行。为获得最佳的实验结果，最好在取血 2h 内进行实验，血液存放时间越长，细胞分离效果越差。血液放置超过 6h 后分离效果更差甚至不能达到分离目的。
- 本实验最好不要使用高聚合材质（如聚苯乙烯）的塑料制品，应使用无静电、低静电离心管及未经碱处理过后的玻璃制品，因为静电作用将导致细胞贴壁、碱处理的玻璃表面会变成毛面，影响细胞分离效果。
- 如第一二三层吸不干净，会导致粒细胞等混杂。
- 如所实验后细胞得率或活性过低，请联系技术支持以寻求帮助。
【储存条件及有效期】常温保存，有效期 2 年。本品易感染细菌，需无菌条件操作。无菌条件下操作，启
封后置常温保存。如 4℃保存，本分离液易出现白色结晶，影响分离效果。
【参考值（参考范围）】本实验红细胞提取率及纯度均大于 80%。
下表为成年人外周血中各种细胞的数量及比例，用户可适当进行参考。
| 红细胞 | | 白细胞 | | 血小板 |
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| | （4.0-10.0）×109 | |
| 含量（个/L） | （4.0-5.5）×1012 | 中性粒细胞 | 淋巴细胞 | 单核细胞 | （1.0-3.0）×1011 |
| | 50%-70% | 20%-40% | 3%-8% | |
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【相关实验技术方案】- 本分离液分离细胞的原理为密度梯度离心，其密度与温度、大气压等密切相关。不同地区客户可根据当地情况对离心条件进行适当调整。建议对离心条件进行调整时，恒定离心时间，对离心转速进行调整。
- 本分离液依照国际标准，全部使用药用级原料，性能指标与国产同类产品略有不同，可
能出现红细胞沉降不完全的情况，可以适当加大离心转速。
注：在对离心条件进行调整时，离心转速的加减以 50-100g 为基数，直至达到最佳分离效果，
离心力最小不得小于 400g，最大不得大于 1200g。离心时间以 20-30min 为准。
