内皮素(ET-1)适用: 组织与细胞培养基、血清游离脂肪酸测定。灵敏度范围2.5-2000 μmol/L,样品FFA浓度过高应稀释后测定。
所需设备:所需设备:721、722型可分光光度计、酶标仪、96孔酶标板。工作波长550 nm。
内皮素(ET-1)产品优点:
1、线性范围:0-500U/L(判定依据:r2≥0.995);
2、准确度:不准确度≤10%;
3、精密度:批内CV<4.0%;批间相对极差<6.0%;
4、灵敏度:试剂检测下限≤4.0U/L。
内皮素(ET-1)样品收集、处理及保存
细胞培养上清:适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液,以1000×g离心15分钟,收集上清。
细胞:用PBS反复洗涤细胞3次,调整细胞浓度达到104-106/ml 左右,通过反复冻融,使细胞破坏并放出细胞内成份,或者细胞超声粉碎,离心取上清液检测。
血清:在室温下,血液自然凝固,以1000×g离心15分钟,取上清待测。
血浆:应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合后静置10-20 分钟后,以1000×g离心15分钟,收集上清。
体液:包括胸腹水、脑脊液,分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集,以1000×g离心15分钟,收集上清。
组织标本:切取组织标本,称取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或匀浆器,或超声破碎仪将标本匀浆,以2000-3000rmp离心20 分钟,收集上清进行检测。
样品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
保存:如果样品不能立即检测,应将其分装,-70 ℃保存,避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀,应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
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