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大鼠组织因子（TF）ELISA Kit

￥1
仕诺达
安徽
2021-09-10 21:36
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滁州仕诺达生物科技有限公司

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滁州仕诺达生物科技有限公司
姜熙
18175256626
1104927736@qq.com
1104927736
产品属性
供应商仕诺达生物
数量999
样本血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本
标记物大鼠组织因子
适应物种大鼠
应用学校、研究院等
检测方法ELISA
检测限详见说明书
规格48T/96T
产品说明
本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断
大鼠（Rat）组织因子（TF）ELISA检测试剂盒
使用说明书
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被组织因子（TF）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的组织因子（TF）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
  1. 酶标仪（450nm）
  2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
  3. 37℃恒温箱
  4. 操作注意事项
  5. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
  6. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
  7. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
  8. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
  9. 所有液体组分使用前充分摇匀。
  10. 试剂盒组成
    名称96孔配置48孔配置备注
    微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无
    标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无
    样本稀释液6mL3mL无
    检测抗体-HRP10mL5mL无
    20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释
    底物A6mL3mL无
    底物B6mL3mL无
    终止液6mL3mL无
    封板膜2张2张无
    说明书1份1份无
    自封袋1个1个无
    注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、15、30、60、120、240 pg/mL
    试剂的准备
     20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
    洗板方法
  11. 手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。
  12. 自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。
  13. 操作步骤
  14. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
  15. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
  16. 样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。
  17. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
  18. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
  19. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
  20. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
  21. 结果判断
    绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。

    试剂盒性能
  22. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
  23. 灵敏度：最低检测浓度小于1.0 pg/mL。
  24. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
  25. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
  26. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
  27. 有效期：6个月
  28. 免责声明
  29. 试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。
  30. 严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。
  31. ：板内、板间变异系数均小于15%。
  32. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
  33. 有效期：6个月
免责声明
  1. 试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。
  2. 严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。

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滁州仕诺达生物科技有限公司（Chuzhou shinuoda Biological Technology Co., Ltd.）是一家以技术开发、转让、销售及咨询服务为一体的生物科技有限公司，公司主要研发销售生物试剂，为全球科研客户提供优质的产品和技术服务。 公司主营产品包括：ELISA试剂盒、动物血制品、标准品、染色液、试剂、抑制剂、酶相关试剂以及仪器设备等 经销品牌：Thermo Fisher Scientific、CST、abcam、santa cruz、sigma、Corning、Axygen、NEB、Novus、BD、R&D、阿拉丁（未提及品牌，本公司也可以代买） 公司以“产品质量第一，服务至上”为企业宗旨，秉承友好共赢的合作理念，立志给科研界老师提供我们力所能及的帮助。如果您对我公司的产品及服务有兴趣，期待您给我们个机会在线留言或者来电咨询。
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