产品说明
大鼠角膜成纤维细胞培养试剂盒【Rat EyePrimaCell：Normal Corneal Fibroblasts】
角膜(Cornea)位于眼球前壁的一层透明膜，约占纤维膜的前1/6，从后面看角膜呈正圆形，从前面看为横椭圆形。其中，大鼠角膜成纤维细胞是结缔组织中最常见的一种细胞，其功能是可在角膜创伤后修复组织。大鼠角膜成纤维细胞传10代仍可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。 利用本公司试剂盒中提供的角膜组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的角膜组织片能使得角膜组织中成纤维细胞的一些功能特性发生改变，从而将成纤维细胞分离开来。本试剂盒适用于分离培养大鼠角膜成纤维细胞。本体系提供了最佳的组织分离条件，分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。 大鼠角膜成纤维培养试剂盒适合于培养大鼠的成纤维组织细胞。本试剂盒包含： （1）OptiTDSTM大鼠角膜成纤维细胞组织解离液（3×1ml） （2）大鼠角膜成纤维细胞组织处理缓冲液（100ml） （3）大鼠角膜成纤维组织洗液（5 x 100 ml） （4）大鼠角膜成纤维细胞生长因子（1ml500X）及血清（5x10ml） （5）大鼠角膜成纤维细胞基础培养基（5 x 100ml） （6）大鼠角膜成纤维组织预备液（1 x 100 ml） （7）大鼠角膜成纤维细胞培养试剂盒使用说明书
大鼠角膜成纤维细胞培养试剂盒【Rat EyePrimaCell：Normal Corneal Fibroblasts】
产品信息：
主要步骤
基质胶铺板、接种细胞
培养细胞、需要加药物的按相应浓度加入
细胞计数、结果统计
实验步骤：
1、大鼠角膜成纤维细胞培养试剂盒【Rat EyePrimaCell：Normal Corneal Fibroblasts】先用marker笔在6孔板背后，用直尺比着，均匀得划横线，大约每隔1cm一道，横穿过孔。每孔至少穿过5条线。
2、在空中加入约5×105个细胞，具体数量因细胞不同而不同，掌握为过夜能铺满。
3、第二天用枪头比着直尺，尽量垂至于背后的横线划痕，枪头要垂直，不能倾斜。
4、用PBS洗细胞3次，去处划下的细胞，加入无血清培养基。
5、放入37度5% CO2培养箱中培养。按0，6，12，24小时取出，拍照 (具体时间依实验需要而定)。
6、统计方法：使用Image J软件打开图片后，随机划取6至8条水平线，计算细胞间距离的均值。
7、数据处理：每个时间点的距离长度-0h距离=每个时间长度细胞整体迁移的距离，求出均数和标准差，时间为横轴，迁移距离为纵轴（mm）作图，并比较初始0h与实验结束时试验组与对照组的照片。
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试剂及耗材
大鼠角膜成纤维细胞培养试剂盒【Rat EyePrimaCell：Normal Corneal Fibroblasts】Transwell板：
孔径<3.0µm 细胞共培养 研究下室细胞B代谢物（分泌物）对上室细胞A的影响
孔径=5.0、8.0、12.0µm 细胞趋化 计数进入下室的细胞量，研究下室营养成分或趋化因子对上室细胞的影响
孔径=8.0、12.0µm 细胞迁移 计数进入下室的细胞量，研究上室细胞的迁移能力
孔径=8.0、12.0µm 细胞侵袭 计数进入下室的细胞量，研究上室细胞的侵袭能力
