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ScienCell
中国/美国
2021-09-11 20:42
我要认领上海烜雅生物科技有限公司
黄经理
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产品属性
产品说明
人神经细胞(HN)(详细信息)传授人神经细胞(HN)细胞培养
细胞培养基本方法
【产品来源】 细胞主要来源ATCC、ScienCell、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系细胞复苏步骤一、所需仪器:离心机生物安全柜电动移液器CO2培养箱倒置显微镜液氮罐恒温水浴锅二、所需试剂:胎牛血清(FBS)无菌1×PBS pH=7.2完全培养基三、所需耗材:离心管(15ml、50ml)T-25细胞培养瓶一次性无菌移液管(2ml、5ml、10ml)四、操作步骤:- 将恒温水浴锅中的水预热到37℃;
- 从液氮罐中取出要复苏的细胞,尽快转入恒温水浴锅中复温,工程中需要不断震荡冻存管以提高复温速率;
- 将融化了的冻存管中的用移液管转入一直装有5ml完全培养基的15ml离心管中,充分混匀后,300g离心5min;
离心完成后弃去上清,用1ml完全培养基重悬细胞后,转入T-25细胞培养中,再加完全培养基4ml,之后转入CO2培养箱中培养静置。细胞冻存步骤一、所需仪器:-86℃超低温冰箱离心机生物安全柜电动移液器CO2培养箱倒置显微镜液氮罐二、所需试剂:胎牛血清(FBS)细胞培养级DMSO冻存液:80%FBS+20%DMSO无菌1×PBS pH=7.2消化液:0.25%胰蛋白酶+0.02%EDTAisopropanol三、所需耗材:离心管(15ml、50ml)T-25细胞培养瓶一次性无菌移液管(2ml、5ml、10ml)1.8ml冻存管程序降温盒四、操作步骤:- 将需要那冻存的细胞从CO2培养箱中取出,在生物安全柜内,打开培养瓶瓶口,吸弃瓶内的培养基;
- 向培养内加入无菌1×PBS 3ml,之后水平放置培养瓶,旋转震荡培养瓶,使PBS能够浸润到培养平面上所都的面积,吸弃PBS;
- 重复步骤2一次,之后向瓶内加入消化液1ml,轻微震荡后放入37℃CO2培养箱中孵育2-4min;
- 孵育完成后在倒置显微镜下观察细胞是否变圆飘起,如还有部分细胞为消化下来,可在生物安全柜内用移液管吸起消化液,吹打培养平面;
- 向消化下细胞的培养瓶中加入1ml含血清的完全培养基终止消化,然后将培养瓶中的液体转入15ml离心管中,300g离心5min;
- 离心完成后,弃上清,用0.5mlFBS重悬细胞,再加入0.5ml冻存液,用移液管充分混匀,之后转入1.8ml冻存管中;
- 将冻存管转入填充满isopropanol的程序降温盒中,之后转入-80℃冰箱中过夜降温;
8.第二天,取出降温完成的序降温盒中的冻存管,尽快转入液氮罐中保存。
★★★★★希望这些培养的方法可以帮到您★★★★★
质量可靠,售后有保障 ★我库细胞近3000种,来源于美国ATCC.细胞都是经过严格质量控制。
冻存细胞时间为5-7个工作日,活细胞为7-15个工作日。
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收货后十个工作日内有其他问题提供照片可半价重发人神经细胞(HN)产品说明书请向我司客户索取
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