| 服务名称 | microRNA实时荧光定量PCR服务 |
| 提供商 | 上海诺论生物 |
| 规格 | 25 µg |
microRNA荧光定量PCR
实时荧光定量PCR技术是在PCR反应体系中加入荧光试剂或使用荧光探针法,利用荧光信号实时检测PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR能够专一、灵敏、快速、高重复性地精确定量起始模板浓度。但是就成熟的microRNA而言,由于其是由21-25个核苷酸组成的小RNA,长度太短,并不能通过传统的实时定量PCR进行检测,但是通过特殊设计的茎环结构的反转录引物,配合实时定量PCR引物及探针可以精确检测微量样品中microRNA表达水平,也可以用终点PCR法定性检测。
检测方法
TaqMan 探针法,染料法。
服务流程
样品准备→ 总RNA提取→反转录 → 荧光定量PCR检测 → 数据分析及结论。
技术优势
1.高特异性 , 可以只对成熟 microRNA 进行定量,有效区分成熟 microRNA 分子和前体分子以及其它成熟 microRNA 的同源分子;
2.快速,简单,省时,整个操作只需两步,不到 3 个小时,即可获得高质量的数据;
3.检测灵敏度高,样品消耗少,仅需 1-10ng 的总 RNA 或 50pg 左右的 microRNA ;
4.超宽的线性范围,可跨越 7 个数量级;
服务要求
1)请认真填写荧光PCR检测技术服务委托单。
2)进行miRNA表达量分析时,请寄送足量且保证纯度的总RNA(浓度在500ng/μl以上,体积在20μl以上)。
3)如果提供的材料为细胞或组织,DNA、RNA抽提费用另收,同时应保证材料新鲜,动物细胞数为106个以上,动物组织为20 mg以上。
服务流程:
实验用品准备→ 样本总RNA提取→ RNA浓度检测→反转录 → 普通PCR检测 → 荧光定量PCR检测 → 数据分析及结论