玉米霜霉病菌PCR试剂盒

¥2490
康朗生物
中国/上海
2021-09-14 18:34

上海康朗生物科技有限公司

我要认领
上海康朗生物科技有限公司
蔡盼
18217752821 021-61998208
shklbio@163.com
产品属性
数量大量
英文名Peronosclerospora spp.
保质期一年
供应商上海康朗生物科技有限公司
保存条件负20度
规格50次
产品说明
玉米霜霉病菌PCR试剂盒
Peronosclerospora spp.
产品及特点
1. 即开即用,用户只需要提供DNA模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增玉米霜霉病菌,与其他病原没有交叉反应。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次,但只能用于科研。


规格及成分
编号成分规格
试剂一2×PCR MagicMix1 mL(红盖)
试剂二超纯水1 mL(亮黄色)
试剂三玉米霜霉病菌 PCR 引物混合液100 μL(白盖)
试剂四玉米霜霉病菌 PCR 阳性对照
1×10E8 拷贝/μL
50 μL(黄盖)
试剂五使用手册1 份
运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。
自备试剂 样品 DNA。
使用方法一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化N+2个样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N个样品,则需要做N+2个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加 10μL 玉米霜霉病菌 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。


二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
3. 对N+2个样品,在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性
对照,故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分:
成份N+2 个
样品管
PCR 阴性
对照
PCR 阳性
对照
PCR Magic Mix 3.0各 20μL20μL20μL
玉米霜霉病菌
PCR 引物混合液
各2μL2μL2μL
N+2个样品
DNA模板
各18μL----
PCR 阴性对照(水)--18μL--
PCR 阳性对照(玉米霜霉病菌PCR阳性对照1000倍稀释液)----18μL
  1. 按下表设置 PCR 反应:
过程温度时间
预变性95℃5 min
PCR 反应
(35 个循环)
95℃30 sec
55℃30 sec
72℃40 sec
最后延伸72℃7 min
  • 电泳检测
    5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测PCR产物。本产品提供的PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释10倍后重复PCR扩增以排除PCR抑制剂的感染。

    本试剂盒适用于各种 RNA制品的反转录反应以及随后的PCR扩增。它采用AMV进行反转录反应,能够获得更长的反转录产物。同时,在20ul反转录体系和50ul PCR反应体系中,还可以一次性得到足够量的PCR产物用于后续的克隆实验。本试剂盒中配置的酶均为进口的酶。RT酶采用进口的AMV,所以cDNA更长,基因的信息保留得更完整!反转录过程中特异的RNase抑制剂可有效降低由于外源RNase污染而导致实验失败的风险。本试剂盒使用方便、快捷,可广泛用于cDNA克隆及目的基因检测等分子生物学实验。
    注意:
    1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
    2. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!