特别提示：包括核酸外切酶I在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：核酸外切酶I
英文名称：Exonuclease I, E.coli
产品货号：MT0087
产品规格：1500U|15000U

核酸外切酶I具有从3’-5’方向降解单链 DNA的外切酶活性，能够逐步释放脱氧核糖核酸5"单磷酸，并留下完整的5"端二核苷酸。该酶来源于携带有E. coli exo I 基因的质粒，经重组表达纯化而得。Exonuclease I多用于PCR扩增后降解消化引物，该酶对于双链DNA和磷酰或乙酰基团封闭的3’OH末端DNA链无活性。

产品组成：

组分	1500U
Exonuclease I(20 U/μl)	75μl
10×ExoI Buffer	1ml

保存条件：置于-20℃，可保存3年。

单位定义：1 单位指在37℃ 条件下，30 分钟内催化释放 10nmol的酸溶性核苷释放所需要的酶量。

产品应用：
·从PCR混合物中去除引物；
·PCR产物测序之前用于在单管中使用大引物进行的PCR诱变反应；
·从核酸混合物中去除含有3"羟基末端的单链DNA；
·检测含有3"羟基末端的单链DNA的存在。

使用注意事项：
1．1×ExoI Buffer：67mM Glycine-KOH pH 9.5，6.7mM MgCl2，10mM 2-巯基乙*(代"醇")。该酶在常规PCR Buffer中也具有活性。
2．该酶的最佳反应温度为37℃，80℃ 20分钟可失活。
3．该酶不能切割双链DNA，因此含有二级结构的单链DNA需要变性后才能完全消化。

核酸酶选择指南：

货号	酶	消化活性	底物	产物	用途
MT0068	Benzonase核酸酶	核酸内切酶活性	任何形式的DNA/RNA	3-5bp寡核苷酸	消化任何形式的核酸; 去除蛋白样品中的核酸污染。
MT0084	T5核酸外切酶	5"-3"核酸外切酶活性	单链和双链DNA	dNMP至6寡核聚体	DNA消化和Gibson组装
MT0085	T7核酸外切酶	5"-3"核酸外切酶活性	双链DNA	ssDNA和二核苷酸	消化双链DNA
MT0086	λ核酸外切酶	5"-3"核酸外切酶活性	单链和双链DNA	ssDNA和dNMP	消化双链DNA
MT0087	核酸外切酶I	3"-5"单链外切酶活性	单链DNA	dNMP、二核苷	PCR扩增后降解消化引物
MT0088	热敏双链DNA核酸酶)	双链DNA核酸酶活性	双链DNA	2-8bp寡核苷酸	去除RNA样品中的DNA污染。
MT0089	Rnase H	核糖核酸内切酶活性	杂交到DNA链上的RNA	ssDNA和2-8bp的 5"磷酸寡核苷酸	除去杂交到poly(dT)上的mRNA poly(A); 在cDNA第二链合成时除去mRNA。
MT0090	Dnase I	核酸内切酶活性	单链和双链DNA	2-3bp寡核苷酸	蛋白样品中DNA的去除
MT0091	Rnase A	核酸内切酶活性	单链RNA	3"-核苷磷酸	质粒或基因组中RNA污染的去除
MT0092	DNA损伤修复酶	核酸外切酶活性	DNA		DNA修复

除了核酸外切酶I,，我公司还供应以下相关产品：



名称：T4聚核苷酸激酶
货号：BTN120506
规格：250U
T4聚核苷酸激酶能够催化ATP的γ-位磷酸基团转移到寡核苷酸链(双链或单链DNA或RNA)的5′-羟基末端以及3′-单磷酸核苷上。本产品还具有3′磷酸酶活性，将3′-磷酸基团从寡核苷酸的3′磷酸末端、脱氧3′-单磷酸核苷和脱氧3′-二磷酸核苷上水解掉。其反应示意图如下：


产品用途：
1．DNA或RNA的末端标记，用作寡核苷酸探针和进行DNA测序。
2．寡核苷酸5′末端的磷酸化，以便进行连接反应。
3．除去3′磷酸基团。

产品组成：

成分	规格
T4聚核苷酸激酶，10U/μL	25μl
10×反应缓冲液	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：1 单位指在37℃条件下，30分钟内催化 1nmol 酸不溶性 [32P] 掺入所需要的酶量。

1×反应缓冲液：[70mM Tris-HCl(pH7.6@25℃)，10mM MgCl2，5mM DTT]，37℃温育。

热失活：65℃加热20分钟。

来源：重组E.coli菌株，克隆有T4多聚核苷酸激酶或修饰的T4多聚核苷酸激酶基因。

自备试剂：0.5M EDTA(pH8.0)、[γ-32P或γ-33P]-ATP或0.1mM ATP、DNA纯化试剂盒。

使用方法：

一、DNA 5′末端标记：
1．参考如下表格设置反应体系：

待磷酸化DNA	1～50 pmol(5′末端)
10×反应缓冲液	5μL
自备的[γ-32P或γ-33P]-ATP(3000Ci/mmol)	50pmol
补充无核酸酶的去离子水	至48μL
T4聚核苷酸激酶,10U/μL	2μL

2．按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用Vortex在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。
3．37℃孵育30分钟。
4．加入自备的1μL 0.5M EDTA(pH8.0)混匀，以终止反应。
5．后续可以使用酚氯*抽提、乙醇沉淀等方法纯化标记的DNA，也可以使用适当的DNA 纯化试剂盒进行纯化。DNA纯化试剂盒可以向我公司订购。

二、DNA 5′末端磷酸化：
1．参考如下表格设置反应体系：

待磷酸化DNA	1～50 pmol(5′末端)
10×反应缓冲液	5μL
自备的0.1mM ATP	3μL
补充无核酸酶的去离子水	至48μL
T4聚核苷酸激酶，10U/μL	2μL

2．按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用Vortex在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。
3．37℃孵育30分钟。
4．加入自备的1μl 0.5M EDTA(pH8.0)混匀，以终止反应。
5．后续可以使用酚氯*抽提、乙醇沉淀等方法纯化标记的DNA，也可以使用适当的DNA 纯化试剂盒进行纯化。