【背景】：T2毒素（T2）是由多种镰刀菌产生的一种霉菌毒素。主要污染小麦、大麦、玉米等粮食作物及其制品，对人类健康及畜牧业构成了较大危害。T2毒素主要影响血液，肝脏，肾脏，胰腺肌肉及淋巴细胞的功能，T2毒素中毒后的一般临床症状为厌食、呕吐、腹泻、生长停滞、繁殖和神经机能障碍等。使用T2毒素试剂盒则能够快速而准确的分析样品中T2毒素残留。 【检测原理】：本试剂盒采用一步竞争ELISA方法检测玉米、大米、豆类、花生、燕麦、饲料等样本中的T2毒素，试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶标记物、抗体、标准品及其他配套试剂组成。检测时，酶标板微孔条上预包被T2毒素抗原与样本中T2毒素竞争抗T2毒素抗体(抗体工作液)，同时抗T2毒素抗体与酶标二抗（酶标记物）相结合，经TMB底物显色，样本吸光值与其含有的T2毒素成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中T2毒素的含量。 【实验方法】：竞争法ELISA（定量） 【样本类型】：花生、玉米、燕麦、大豆、饲料等样品。 【规格型式】：96孔板 【保存条件】：试剂盒未拆开，2-8℃保存。 【有效期】：6个月。 【灵敏度】：0.05ppb。 【检测下限】：花生、玉米、燕麦、大豆、饲料等……………6ppb 【样本回收率】：花生、玉米、燕麦、大豆、饲料等……………110±15% 【花生、玉米、燕麦、大豆、饲料等样品处理方法】： 1）取1g粉碎样品，加入20ml样品提取液；2）剧烈振荡5min；3）室温4000转/分离心5分钟（或用定量分析滤纸过滤）；4）取上清液，用蒸馏水或去离子水按1∶5（即：取1份上清液+5份去离子水）比例稀释；5）取50μl进行分析。 稀释倍数：120 【结果分析】： 百分吸光率的计算 标准液或样本的百分吸光率等于标准液或样本的百分吸光度值的平均值（双孔）除以第一个标准液（0ppb）的吸光度值，再乘以100%，即百分吸光度（%）= A/A0 ×100%A—标准溶液或样本溶液的平均吸光度值A0—0ppb标准溶液的平均吸光度值标准曲线的绘制与计算以标准液百分吸光率为纵坐标，对应的标准液浓度（ppb）的对数为横坐标，绘制标准液的半对数曲线图。将样本的百分吸光率代入标准曲线中，从标准曲线上读出样本所对应的浓度，乘以其对应的稀释倍数即为样本中待测物的实际浓度。若利用试剂盒专业分析软件进行计算，更便于大量样本的准确、快速分析。 【注意事项】： 1 室温低于25℃或试剂及样本没有回到室温（25℃）会导致所有标准的OD值偏低。2 在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况，则会出现标准曲线不成线性，重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。3 混合要均匀，洗板要彻底，在ELISA分析中的再现性，很大程度上取决于洗板的一致性。4 在所有孵育过程中，用盖板膜封住微孔板，避免光线照射。5 不要使用过了有效期的试剂盒，不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。6 显色液若有任何颜色表明变质，应当弃之。0标准的吸光度值小于0.5个单位（A450nm< 0.5 ）时，表示试剂可能变质。7 反应终止液有腐蚀性，避免接触皮肤。 【需用户自己提供的实验器材和试剂】： 1. 96孔读板仪器。2. 自动洗板机.3. 移液器和枪头。建议使用多通道移液器/排枪。4. Eppendorf 管。5. 额外洗板缓冲液 (neutral PBS 或 TBS。试剂盒内提供足量。如需额外缓冲液可参考如下配方)。0.01M TBS: Add 1.2g Tris, 8.5g Nacl; 450μl of purified acetic acid or 700μl of concentrated hydrochloric acid to 1000ml H2O and adjust pH to 7.2-7.6. Finally, adjust the total volume to 1L.0.01M PBS: Add 8.5g sodium chloride, 1.4g Na2HPO4 and 0.2g NaH2PO4 to 1000ml distilled water and adjust pH to 7.2-7.6. Finally, adjust the total volume to 1L.*样品准备的相关试剂也不含在试剂盒中。